文档介绍：微生物的实验室培养
教材分析 ：
“微生物的实验室培养” 是研究和应用微生物的前提， 其基本操作技术是生物科学、 医学等
领域最基本的实验技术， 也是高中生必须掌握的实验操作技术。 “微生物的实验室培养”是
（ 3）对接种室、接种箱或超净工作台首先喷洒
石炭酸或煤酚皂
等溶液以增强消毒效
果，然后使用
紫外线 进行物理消毒。
（ 4）实验操作者的双手使用
酒精 进行消毒；
思考：物品装入高压蒸
（ 5）饮水水源用 ***气 进行消毒。
汽灭菌锅灭菌后，要首先打
3、灭菌方法：
开排气阀，煮沸并排除锅内
（ 1）接种环、接种针、试管口等使用
灼烧 灭菌法；
冷空气，其目的是 有利于锅
内温度升高 ；随后关闭排气
（ 2）玻璃器皿、 金属用具等使用
干热 灭菌法， 所用器械是
干
阀继续加热， 气压升至 100k
热灭菌箱 ；
Pa，温度为 121℃ ，并维持
（ 3）培养基、 无菌水等使用
高压蒸汽
灭菌法， 所用器械是
高
15～ 30 min；最后切断热源，
使温度自然降温，气压务必
压蒸汽灭菌锅
。
降至 零
时打开锅盖，其目
（ 4）表面灭菌和空气灭菌等使用
紫外线 灭菌法，所用器械是
的是防止
容器中的液体暴
紫外灯 。
沸 。
4、消毒和灭菌比较（填表）
比较项
理化因素的
消灭微生物的数量
芽孢和孢子能否被消灭
作用强度
消毒
较为温和
部分生活状态的微生物
不能
灭菌
强烈
全部微生物
能
三、实验操作
一）、制备牛肉膏蛋白胨固体培养基
计算 → 称量 → 融化 → 调 pH → 灭菌 → 倒平板
1、计算：根据配方比例，计算 100mL 培养基各成分用量。
2、称量：准确称取各成分。称取牛肉膏和蛋白胨时动作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空气中水分。
3、溶化：①加水加热熔化牛肉膏；②加入蛋白胨和***化钠继续加热；③加入琼脂；④用蒸馏水定容到 100mL 。整个过程不断用玻棒搅拌，目的是防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
4、调 pH ：用 1mol/LNaOH 溶液调节 pH 至偏碱性。
5、灭菌：将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加塞包扎后用高压蒸汽灭菌锅灭菌；所用培
养皿用报纸包扎后用干热灭菌箱灭菌。
6 、倒平板：待培养基冷却至 50℃左右时在酒精灯火焰附近
操作进行。
其过程是：
①在火焰旁右手拿锥形瓶，左手拔出棉塞；
②右手拿锥形瓶，使锥形瓶的瓶口迅速通过火焰；
③左手将培养皿打开一条缝隙， 右手将培养基倒入培养皿，立