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香肠中亚硝酸盐含量的测定(共3页).doc

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香肠中亚硝酸盐含量的测定(共3页).doc

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实验课题:用分光光度法测香肠中亚***盐的含量


实验人员
二、实验目的
测定香肠中亚***盐的含量。
三、实验原理
亚***盐采用盐酸萘乙二***法测定。
利用碱性的硼砂将脂肪从样品中分离,利用乙酸锌及亚铁***化钾使蛋白质变性分离。
试样经沉淀蛋白质、除去脂肪后,在弱酸条件下亚***盐与对氨基苯磺酸氮化后,再与盐酸萘乙二***偶合形成紫红色染料,利用分光光度法来测定,最大吸收波长为540nm。根据朗伯比尔定律,并结合工作曲线,可以得到香肠中亚***盐的含量(mg/kg)。
四、试剂和材料
除非另有规定,本方法所用试剂均为分析纯水,为GB/T 6682规定的二级水或去离子水。
1、双汇王中王香肠一根(净含量:50g)
2、乙酸锌溶液(220g/L):称取11g乙酸锌,,用水稀释至50 mL。
3、亚铁***化钾溶液(106 g/L): g亚铁***化钾,用水溶解,并稀释至50mL。
4、饱和硼砂溶液(50g/L): g硼酸钠,溶于50mL热水中,冷却后备用。
5、亚***钠标准溶液(10μg /mL)
6、对氨基苯磺酸溶液(%)
7、盐酸萘乙二***溶液(%)
五、仪器和设备
1、天平:
2、研钵
3、分光光度计
4、电热炉
5、50ml烧杯1个、500ml容量瓶1个、50m容量瓶10个、胶头滴管、各个规格的移液管、玻璃棒
六、实验步骤
(一)试样的预处理:
1、取全部,用研钵制成匀浆备用。
2、称取5g( g)制成匀浆的试样置于50 mL烧杯中, mL 饱和硼砂溶液,搅拌均匀,以70 ℃左右的水约300 mL 将试样洗入 500 mL容量瓶中,80℃加热 15 min,取出置冷水浴中冷却,并放置至室温。
3、在振荡上述提取液时加入5 mL 亚铁***化钾溶液, 摇匀, 再加入 5 mL 乙酸锌溶液,以沉淀蛋白质。加水至刻度, 摇匀, 放置30 min, 除去上层脂肪, 上清液用滤纸过滤(用移液管吸取中间澄清的部分)。弃去初滤液30 mL,滤液备用。
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(二)亚***盐的测定
1、 mL 上述滤液于50 mL 容量瓶中, mL、 mL、 mL、 mL、 mL、 mL 亚***钠标准液(、 μg、、、20.