文档介绍:大家好
华东理工大学继续教育学院课程——微生物学
第三章
病毒与亚病毒
前言——
记载最早病毒病-天花
中国:北宋时期
防止天花:牛痘(英国乡村医生詹纳)
18代埃及王朝时代(公元前1500年, 以螺旋对称和二十面体对称( 等轴对称)为主。另一些结构较复杂病毒, 实质上是上述两种对称相结合结果, 称作复合对称。
螺旋对称代表———烟草花叶病毒
烟草花叶病毒简称TMV。由95% 衣壳蛋白和5% 单链RNA( ssRNA) 组成。衣壳含2 130个皮鞋状蛋白亚基即衣壳粒。
每个亚基含158 个氨基酸, 相对分子质量为17 500。亚基以逆时针方向作螺旋状排列, 每圈为49 个核苷酸。
二十面体对称代表———腺病毒
腺病毒( Adenovirus) 是一类动物病毒, 1953 年首次从手术切除小儿扁桃体中分离到。
腺病毒外形呈“球状”, 实质上却是一典型二十面体对称。没有包膜。它有12个角、20 个面和30 条棱。每个五邻体上突出一根末端带有顶球蛋白纤维, 称为刺突。腺病毒核心是由36 500 bp线状双链构成。
复合对称代表———T 偶数噬菌体
E .coli T 偶数( even type ) 噬菌体共有3 种, 即T2、T4 。
T4 由头部( head )、颈部( neck) 和尾部( tail ) 3 部分构成。由于头部呈二十面体对称而尾部呈螺旋对称, 故是一种复合对称结构。
T-偶数噬菌体头部为一变形二十面体结构。头部含有双链DNA。
其尾部结构复杂,由尾管(tail tube)、尾鞘(tail sheath)、颈部(collar)、基片(base plate)、尾钉(tail pin)和尾丝(tail fiber)5个主要部分组成。
核酸构成了病毒基因组(genome ) , 它是病毒粒中最重要成分, 具有遗传信息载体和传递体作用。
病毒核酸种类很多, 是病毒系统分类中最可靠分子基础, 主要有
以下几个指标:
①是DNA 还是RNA;
②是单链还是双链;
③呈线状还是环状;
④是闭环还是缺口环;
⑤基因组是单分子、双分子、三分子还是多分子;
⑥核酸碱基或碱基对数, 以及核苷酸序列等。
4、病毒培养和纯化
噬菌体
细菌培养物
培养液
营养琼脂平板
细菌培养液变清亮
细菌平板成为残迹平板
若是噬菌体标本经过适当稀释再接种细菌平板,经过一定时间
培养,在细菌菌苔上可形成圆形局部透明区域,噬菌斑(plague)
如同对细菌计数一样,形成噬菌斑也可用于对
噬菌体数目进行估算。
动物病毒
实验动物
鸡胚
多种细胞培养
Egg-Based Vaccine Production
Currently commercialized seasonal influenza vaccines rely upon the supply of embryonated chicken eggs as the substrate for virus propagation.
蛋白质提纯方法
(盐析、等电点沉淀、有机溶剂沉淀、凝胶层析、离子交换等)
标准
纯化病毒制备物应保持其感染性
病毒是有感染性生物体
病毒具有化学大分子属性
纯化病毒制备物理化性质应具有均一性
方法
主要化学组成为蛋白质
具有一定大小、形状和密度
差速离心
梯度离心
(超速离心)
第二节 四类病毒及其繁殖方式
以大肠杆菌病毒T4噬菌体为例
噬菌体即原核生物病毒, 包括噬细菌体、噬放线菌体噬蓝细菌体等, 凡有原核生物活动之处几乎都发现有相应噬菌体存在。
噬菌体种类很多, 可归纳成6 种主要形态, 即①A 型, dsDNA, 蝌蚪状, 收缩性尾; ②B 型, dsDNA, 蝌蚪状, 非收缩性长尾; ③C 型, dsDNA,非收缩性短尾; ④D 型, ssDNA, 球状, 无尾, 大顶衣壳粒; ⑤E 型, ssRNA, 球状, 无尾, 小顶衣壳粒; ⑥F 型, ssDNA, 丝状, 无头尾
噬菌体并没有个体生长过程,而只有其基本成分合成和装配,即首先将各个部件合成出来,然后装配,所以一般将噬菌体繁殖称做复制。
根据噬菌体与宿主关系:
:指感染宿主细胞后,能够使宿主细胞裂解噬菌体.
(或溶源性噬菌体):噬菌体感染细胞后,将其核酸整合(附着)到宿主核DNA上,并且可以随宿主DNA复制而进行同步复制,在一般情况下,不引起寄主细胞裂解噬菌体。
烈性噬菌体繁殖过程一般分为五个阶段: