文档介绍：溶液的配制
包被液－－
洗涤液－－磷酸盐缓冲液＋吐温
封闭液－－明胶
抗体稀释液、样品稀释液、酶标稀释液－－磷酸盐
底物－－－A和B混合液，进口非混合液
有机溶剂－－－乙***等
2. 酶联免疫检测仪
育1小时,洗涤。(同时做空白、阴性及阳性孔对照)于反应孔中，加入新鲜稀释的酶标第二抗体(抗抗体)，37℃孵育30-60分钟，洗涤,最后一遍用DDW洗涤。其余步骤同“双抗体夹心法”的4、5、6。
(三) 试剂器材1. 试剂
(1) 包被缓冲液( ):
NaCO3 NaHCO3 加蒸馏水至1000ml
    (2) 洗涤缓冲液( PBS)： KH2PO4 Na2HPO4·12H2O Tween-20 ％ 加蒸馏水至1000ml
(3) 稀释液:牛血清白蛋白(BSA) 加洗涤缓冲液至100ml 或以羊血清、兔血清等 血清与洗涤液配成5～10％使用。
(4) 终止液(2M H2SO4）：，逐滴加入浓硫酸(98％)。
(5) 底物缓冲液(): Na2HPO4(／L) 柠檬酸(／L) 加蒸馏水50ml。
(6) TMB(四***联苯***)使用液:TMB(10mg／5ml无水乙醇) () ％H2O2 32μl
(7) ABTS使用液:ABTS 底物缓冲液() 1ml 3％H2O2 2μl
(8) 抗原、抗体和酶标记抗体。
(9) 正常人血清和阳性对照血清。2. 器材:
(1) 聚苯乙烯塑料板(简称酶标板)40孔或96孔，ELISA检测仪，50μl及100μl加样器，塑料滴头，小毛巾，洗涤瓶。
(2) 小烧杯、玻璃棒、试管、吸管和量筒等。
(3) 4℃冰箱，37℃孵育箱。
(四) 注意事项 1. 正式试验时，应分别以阳性对照与阴性对照控制试验条件，待检样品应作一式二份，以保证实验结果的准确性。有时本底较高，说明有非特异性反应，可采用羊血清、兔血清或BSA等封闭。
2. 在ELISA中，进行各项实验条件的选择是很重要的，其中包括:
(1) 固相载体的选择：许多物质可作为固相载体，如聚***乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰***和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体，在使用前均可进行筛选：用等量抗原包被，在同一实验条件下进行反应，观察其显色反应是否均一性，据此判明其吸附性能是否良好。
（2) 包被抗体(或抗原)的选择：将抗体(或抗原)吸附在固相载体表面时，要求纯度要好,～。吸附温度，时间及其蛋白量也有一定影响,一般多采用4℃18～24小时。蛋白质包被的最适浓度需进行滴定：即用不同的蛋白质浓度(、／ml等)进行包被后，在其它试验条件相同时，观察阳性标本的OD值。选择OD值最大而蛋白量最少