文档介绍：第8章高效液相色谱法
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一、液相色谱仪器 high performance liquid chromatograph
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液相色谱仪（2）
现在学****的是第3页，共阴离子离子交换树脂或阳离子离子交换树脂；
流动相：阴离子离子交换树脂作固定相，采用酸性水溶液；阳离子离子交换树脂作固定相，采用碱性水溶液；
基本原理：组分在固定相上发生的反复离子交换反应；组分与离子交换剂之间亲和力的大小与离子半径、电荷、存在形式等有关。亲和力大，保留时间长；
阳离子交换：R—SO3H +M+ = R—SO3 M + H +
阴离子交换：R—NR4OH +X- = R—NR4 X + OH-
应用：离子及可离解的化合物，氨基酸、核酸等。
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四、 离子色谱 ion chromatography
离子色谱是在20世纪70年代中期发展起来的一中技术，其与离子交换色谱的区别是其采用了特制的、具有极低交换容量的离子交换树脂作为柱填料，并采用淋洗液抑制技术和电导检测器，是测定混合阴离子的有效方法。
有关内容将在第十章第六节中讲授。
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五、 离子对色谱 ion pair chromatography
原理：将一种（或多种）与溶质离子电荷相反的离子（对离子或反离子）加到流动相中使其与溶质离子结合形成疏水性离子对化合物，使其能够在两相之间进行分配；
阴离子分离：常采用烷基铵类，如氢氧化四丁基铵或氢氧化十六烷基三甲铵作为对离子；
阳离子分离：常采用烷基磺酸类，如己烷磺酸钠作为对离子；
反相离子对色谱：非极性的疏水固定相(C-18柱)，含有对离子Y+的甲醇-水或乙***-水作为流动相，试样离子X-进入流动相后，生成疏水性离子对Y+ X -后；在两相间分配。
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第八章 液相色谱法
一、液相色谱固定相
stationary phase of HPLC
二、液相色谱流动相
mobile phase of HPLC
第三节 液相色谱的固定相与流动相
high performance liquid chromatograph
stationary phase and mobile phase of HPLC
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一、液相色谱固定相 stationary phases of LC
1. 液-液分配及离子对分离固定相
（1）全多孔型担体
由氧化硅、氧化铝、硅藻土等制成的多孔球体；早期采用100μm的大颗粒，表面涂渍固定液，性能不佳已不多见；
现采用10μm以下的小颗粒，化学键合制备柱填料；
（2）表面多孔型担体
（薄壳型微珠担体）
30～40μm的玻璃微球，表面附着一层厚度为1 ～ 2μm的多孔硅胶。
表面积小，柱容量底；
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（3）化学键合固定相
化学键合固定相: 目前应用最广、性能最佳的固定相；
a. 硅氧碳键型： ≡Si—O—C
b. 硅氧硅碳键型：≡Si—O—Si — C
稳定，耐水、耐光、耐有机溶剂，应用最广；
c. 硅碳键型： ≡Si—C
d. 硅氮键型： ≡Si—N
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化学键合固定相的特点
（1）传质快，表面无深凹陷，比一般液体固定相传质快；
（2）寿命长，化学键合，无固定液流失，耐流动相冲击；
耐水、耐光、耐有机溶剂，稳定；
（4）选择性好，可键合不同官能团，提高选择性；
（5）有利于梯度洗脱；
存在着双重分离机制：
(键合基团的覆盖率决定分离机理)
高覆盖率：分配为主；
低覆盖率：吸附为主；
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-固吸附分离固定相
种类：硅胶、氧化铝、分子筛、聚酰***等；
结构类型：全多孔型和薄壳型；
粒度：5～10 μm；
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结构类别：
（1）薄壳型离子交换树脂
薄壳玻璃珠为担体，表面涂约1%的离子交换树脂；
（2）离子交换键合固定相
薄壳键合型；微粒硅胶键合型（键合离子交换基团）