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文档介绍

文档介绍:免疫层析试验对粪便标本中诺洛病毒的快速检测
病毒性肠道感染,影响全球数百万人。主要代理包括轮状病毒,星状病毒,腺病毒,肠道杯状病毒(诺洛病毒和札幌病毒)(克拉克,2004;麦克德瑞克,威廉等人,2003)。这些病毒的传播主要是通过消化
分钟,离心3000×G 10分钟,其次为含有粪便混合管加条试验。它只花了15分钟,得到的实验结果。
对于IC试纸测试,乳胶标记的兔疫多克隆抗体月GI / 1 / 11,GI,GII / 2,GII / 3,GII / 4,GII / 5,和GII / 6基因型涂布在结合垫。测试线也涂有固定化的多克隆抗体,月GI / 1 / 11,GI,GII / 2,GII / 3,GII / 4,GII / 5,和GII / 6基因型,而控制线与抗免疫球蛋白编码。
的基准测试,NOV的RNA基因RST提取是从10%到20%的粪便上清液用QIAamp Viral RNA抽提试剂盒提取。粪便中存在NOV,采用RT-PCR技术。正向引物,g1-skf(NT 5342–5261)5 ctgcccgaattygtaaatga-3,采用反向引物组合g1-skr(NT 5653–5671)5 ccaacccarccattrtaca-3为NOVGI放大器的fi阳离子。NOV GII识别fi阳离子,正向引物,cog2f(NT 5003–5028)5 cargarbcnatgttyagrtggatgag-3,采用反向引物组合g2-skr(NT 5367–5389)5 ccrccngcatrhccrttrtacat-3。所有的NOV阳性样品。
NOV序列和系统进化分析,PCR产物纯化与精灵SV电泳及PCR清理系统和测序,使用BigDye终结者循环测序试剂盒在自动测序仪进一步分析其基因型的核苷酸序列和系统进化分析。用于放大阳离子部分衣壳蛋白基因的引物,也被用来作为测序引物。得到的序列与11株存放在使用BLAST搜索GenBank比较。NOV基因型分ED利用系统聚类方法通过该等人先前确定的。
为评估的敏感性,特异性,与这种新开发的集成套件的整体调整,一组75个粪便样本进行了测试和结果进行了比较与金标准的RT-PCR方法和序列分析。如表1所示,46,75(%)的样品呈阳性,NOV这个IC的试剂盒,而RT-%;%的敏感性。无假阳性NOV检测为本IC测试观察。十四个样品检测结果呈阴性,NOV RT-PCR试剂盒由该集成电路负,导致100%的特殊性。此外,通过比较该IC分析法和RT-PCR方法,这种新开发的集成套件的总符合率为80%。
通过NOV的RT-PCR检测的筛选方法,共75个粪便标本中,61(%)在NOV这些都是积极的,所有阳性样本进行识别NOV GII基因组,只有2个基因型,GII / 3和GII / 4,发现ED的序列和系统进化分析。图1显示的部分在本研究中检测到11月衣壳序列的系统发育分析。它是观察到的这GII / 4是最主要的基因型占多数(48对61;%)基因检测。
有趣的是,所有的月GII / 4分析属于一个新的变种即GII / 4年的亚型,从2006年开始发现不同的亚型:从NOV GII / 4–E,。所有的