文档介绍：菊花的组织培养
现在学****的是第1页，共46页
扦插
嫁接
压条
现在学****的是第2页，共46页
营养繁殖
扦插
嫁接
压条
通过必修课的学****我们已经了解到大多绿色开花植物都是靠种子来繁殖的。那么，有没有不用种页
4、不同植物激素使用量
生长素/细胞分裂素比值
结果
比值高时
比值低时
比值适中
促根分化，抑芽形成
促芽分化，抑根形成
促进愈伤组织生长
现在学****的是第21页，共46页
5、pH、温度、光照（菊花组培）
pH=
温度控制在18—22℃
每日光照12h
6、消毒
在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境
现在学****的是第22页，共46页
1、实验操作流程
制备MS固体培养基
外植体消毒
接 种
培 养
栽 培
移 栽
三、实验操作
现在学****的是第23页，共46页
2、实验具体操作
（1）制备MS固体培养基
实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备
①配制各种母液
配制母液时，大量元素浓缩__________ ，微量元素浓缩__________ 。常温保存。激素类、维生素类以及用量比较小的有机物可以按照__________的质量浓度单独配制母液。用母液配制培养基时，需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
1mg/ml
4
10倍
100倍
三、实验操作
现在学****的是第24页，共46页
②配制培养基。
按配方称取琼脂、蔗糖以及各种母液，配制MS培养基。
2、实验具体操作
（1）制备MS固体培养基
实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备
4
植物激素
在菊花组织培养中，可以不添加_________________ ，原因是菊花茎段组织培养___________________ 。
比较容易
三、实验操作
现在学****的是第25页，共46页
③灭菌
将分装好的培养基连同其他器械一起进行
_________________。
2、实验具体操作
（1）.制备MS固体培养基
实验室一般使用_____℃保存的配制好的培养基母液来制备
4
高压蒸汽灭菌
三、实验操作
现在学****的是第26页，共46页
此时的组织或细胞为离体的，即细胞所生活的环境为液体有机物营养环境，而不是能体现其整个植物体的光能自养。
高等植物是光能自养型生物，为什么在植物组织培养过程中还需要提供有机物培养基？
思 考
？
现在学****的是第27页，共46页
2、实验具体操作
（2）外植体消毒
①选取菊花茎段时，要取 ________________。
流水冲洗
酒精
无菌水
***化***
无菌水
②消毒流程：
浓度______
摇动_____次
时间_____s
浓度______
时间_____min
至少清洗___次
漂净_______
生长旺盛的嫩枝
70%
2～3
6～7
%
1～2
3
消毒水
三、实验操作
现在学****的是第28页，共46页
不是。对外植体进行表面消毒时，既要考虑到消毒效果，又要考虑到植物的耐受能力。
在外植体消毒过程中，是不是强度越大越好，为什么？
思 考
？
现在学****的是第29页，共46页
旁栏思考：你打算做几组重复？你打算设置对照实验吗？
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养，用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染。
现在学****的是第30页，共46页
2、实验具体操作
（3）接种
①前期准备：用_________________消毒工作台，点燃酒精灯。所有工作都必须在酒精灯旁进行，器械使用前后都要用_________________灭菌。
②接种操作：插入外植体时_________________端朝上，每个锥形瓶接种_________________个外植体。
70％的酒精
火焰灼烧
形态学上
6～8
三、实验操作
现在学****的是第31页，共46页
2、实验具体操作
（4）培养
接种后的锥形瓶最好放在__________中培养。培养期间定期进行_________，温度控制在_________℃，并且每天用日光灯光照_________h。
无菌箱
18～22
12
消毒
三、实验操作
现在学****的是第32页，共46页
在培养过程中，是脱分化、再分化的过程，随着芽和根的形成，就具有了自养的能力，是由细胞到一个个体的演变过程
培养过程中为什么需要进行光照？
思 考
？
现在学****的是第3