HPLC法测定银黄甘颗粒中金银花有效成分绿原酸的含量.doc

文档介绍：HPLC法测定银黄甘颗粒中金银花有效成分绿原酸的含量
作者:郑雪媚

摘 要:目的:采用HPLC法测银黄甘颗粒中金银花有效成分绿原酸的含量。方法:测定色谱条件为:A液相色谱仪;柱温箱CTO-20AC;超纯水仪UPR-5T;超声波清洗器KQ-500DE;天平METTLER MS105DU;绿原酸标准品来源:中国食品药品检定研究院;水为超纯水,乙腈为色谱纯。
色谱条件 流动相:乙腈-%磷酸溶液(10∶90),色谱柱:菲罗门C18 ×250mm,检测波长:327nm,流速:,柱温:35℃,进样量:10?L。
对照品溶液的配制 稀释液:流动相。对照储备液:,置100mL棕色量瓶中,加50%甲醇使溶解至刻度,摇匀,作为绿原酸对照品贮备液。,加稀释液定容,?g/mL的对照液。
样品溶液的配制 取银黄甘颗粒适量,研细,,精密称定,置50mL棕色量瓶中,加50%甲醇40mL,超声处理(功率500W,频率40kHz)30min,放冷,加50%甲醇至刻度,摇匀,滤过,取续滤液,即得。
系统适用性试验 ?g/mL的对照溶液10?。色谱条件下进样,测定并计算柱效、分离度和拖尾因子(具体数据见表1)。 线性试验 ?g/mL、?g/mL、?g/mL、?g/mL、?g/mL、?g/mL的系列对照品溶液,,以峰面积对浓度进行回归,绿原酸峰面积的回归方程分别为:Y=27136X-102920(R5=),说明绿原酸在20~250?g/mL范围内具有良好的线性关系(具体见图1)。
重复性试验 精密吸取同一供试品溶液,,进样6次,%,表明样品的重复性良好。具体如表2所示。
回收率试验 精密取已知含量的同一批样品()(共9份)置于50mL容量瓶中,、、,,进样测定。%。具体结果见表3。
供试品的测定 取3批样品及标准溶液,按外标法测定,每批样品进样2次,计算样品中绿原酸含量(图谱见图2)。、、。
2 结论
本试验建立了HPLC法测银黄甘颗粒中绿原酸含量的方法,测定色谱条件为:色谱柱为菲罗门C18 ×250mm,流动相为乙腈-%磷酸溶液(10∶90),,检测波长为327nm,在20~250?g/mL范圍内线性关系良好。该方法具有线性范围宽、分析时间短、样品前处理简便、定量结果准确、重现性好等特点,为其质量控制提供科学依据。
参考文献
[1]王林青,崔保安,张红英,