文档介绍：关于基因工程高中生物
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原核细胞的基因结构(补充内容）
非编码区
非编码区
编码区
编码区上游
编码区下游
与RNA聚合酶结合位点
启动子
终止子
①不编码蛋白质。
：编码DN***段，导入某个生物 体内，则这个生物就是一个基因文库
C、含有一种生物所有基因的基因文库叫做基因组文库
D、含有一种生物的一部分基因的基因文库叫cDNA文库
A
C
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（2）利用PCR技术扩增目的基因
PCR——聚合酶链式反应
是一项生物体外复制特定DN***段的核酸合成技术。通过此技术，可获取大量的目的基因。
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PCR技术
原理：
前提：
原料
方式
PCR扩增仪
DNA复制
一段已知目的基因的核苷酸序列
：以_____方式扩增，
即____（n为扩增循环的次数）
指数
2n
模板DNA；DNA引物；四种脱氧核苷酸；热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；离子
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过程
变性、退火、延伸三步曲
变性：加热至90～95℃双链DNA解链成为单链DNA
退火：冷却至55～60℃部分引物与模板的单链DNA的特定互补部位相配对和结合
延伸：加热至70～75℃以目的基因为模板，合成互补的新DNA链
变性
退火
延伸
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1、在遗传工程中，若有一个控制有利性状的DNA分子片段为ATGTG／TACAC，要使其数量增多，可用PCR技术进行人工复制，复制时应给予的条件是
①双链DNA分子为模板 ②ATGTG或TACAC模板链 ③四种脱氧核苷酸 ④四种核苷酸 ⑤DNA聚合酶 ⑥热稳定DNA聚合酶⑦引物 ⑧温度变化 ⑨恒温
A．①③④⑦⑨ B．①④⑥⑦⑧
C．②⑤⑥⑦⑨ D．①③⑥⑦⑧
D
2、在基因工程中，把选出的目的基因（共1000个脱氧核苷酸对，其中腺嘌呤脱氧核苷酸是460个）放入DNA扩增仪中扩增4代，那么，在扩增仪中应放入胞嘧啶脱氧核苷酸的个数是
B
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（3） 人工合成
——根据已知的氨基酸序列合成DNA
蛋白质的氨基酸序列
mRNA的核苷酸序列
结构基因的核苷酸序列
推测
推测
目的基因
化学合成
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1、在已知序列信息的情况下，获取目的基因的最方便方法是
A、化学合成法    B、基因组文库法
C、cDNA文库法   D、聚合酶链反应
2、下列获取目的基因的方法中需要模板链的是
①从基因文库中获取目的基因 ②利用PCR技术扩增目的基因 ③反转录法 ④通过DNA合成仪利用化学方法人工合成
A．①②③④ B．①②③ C．②③④ D．②③
A
D
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3、目的基因主要是指_______________的结构基因。获得目的基因的常见方法有三种：（1）从基因文库中获取目的基因，根据基因的_________序列，基因在________上的位置，基因的________产物mRNA，基因的_______产物蛋白质等获取目的基因。（2）利用PCR技术扩增目的基因，该技术是一项在________完成的核酸合成技术，前提条件是有一段已知目的基因的________序列，以便于合成_________。（3）如果基因较小且核苷酸序列已知，可以通过____________方法。
编码蛋白质
核苷酸
染色体
转录
表达
体外
核苷酸
引物
人工合成
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二、基因表达载体的构建——核心
（1）用一定的_________切割质粒，使其出现一个切口，露出____________。
（2）用___________切断目
的基因，使其产生_____
____________。
（3）将切下的目的基因片段插入质粒的______处，再加入适量___________，形成了一个重组
DNA分子（重组质粒）
限制酶
黏性末端
同一种限制酶
的黏性末端
切口
DNA连接酶
相同
:
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质粒
目的基因
限制酶处理
一个切口
两个黏性末端
两个切口
获得目的基因
DNA连接酶
表达载体
同种
:
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2、基因表达载体的作用
a、使目的基因在受体细胞中稳定存在并遗传给子代
b、同时使目的基因能表达和发挥作用
思