文档介绍：1 草地早熟禾与青海扁茎早熟禾的过氧化物同工酶的比较分析摘要: 采用聚丙烯酰***凝胶垂直平板电泳( PAGE ) 技术对草地早熟禾( Poa pratensis L. )和青海扁茎早熟禾( Poa pratensis var. cv. Qinghai ) 的过氧化物酶( POD ) 同工酶进行检测和分析, 从生化水平探讨两者的亲缘关系及遗传差异。结果表明, 草地早熟禾与青海扁茎早熟禾在幼叶期、旗叶期的酶谱分别具共有带 8 条、 6 条,其酶带数量、带级、位点及活性强度各不相同, 形成了各自特有的酶谱特征。在幼叶期, 青海扁茎早熟禾具 1 条特征谱带, 而草地早熟禾没有; 在旗叶期, 草地早熟禾具 3 条特征谱带,而青海扁茎早熟禾没有。利用这些酶谱特征找出供试材料间的细微差异是可行的,是两者进行生化水平鉴定的有利指标。关键词:草地早熟禾( Poa pratensis L.) ;青海扁茎早熟禾( Poa pratensis var. cv. Qinghai ); POD 同工酶;聚丙烯酰***凝胶电泳中图分类号: S54 文献标识码: A 文章编号: 0439-8114 ( 2013 ) 16-3901-04 草地早熟禾( Poa pratensis L. )属于禾本科早熟禾属的多年生草本植物, 具有直伸或匍匐的根茎, 且根茎繁生力强, 耐牲畜践踏, 营养丰富, 是各种牲畜喜食的优质牧草[1-3] 。青海扁茎早熟禾( Poa pratensis var. cv. Qinghai )为草地早熟禾的变种,是青海省畜牧兽医科学院草原研究所驯化选育出的青藏高原首个根茎型野生栽培新草种,具有根茎发达、分 2 蘖性强的特性, 固土保水能力很强。草地早熟禾和青海扁茎早熟禾均既能进行种子繁殖也能进行根茎无性繁殖, 具有极强的抗寒性和耐旱性, 是青藏高原高海拔地区人工草地建设和改良、水土保持以及生态环境建设的首选草种, 尤其适合三江源区“黑土型”退化草地植被的恢复与重建[4-8] 。青海扁茎早熟禾为草地早熟禾的变种,二者的形态特征较为相似,可作为分类依据的器官结构较细微, 受环境影响变异性较大, 故形态学变异很难反映其遗传差异。而目前对青海扁茎早熟禾遗传特性及杂交育种的研究少有报道,关于其与草地早熟禾在生化水平上的遗传研究则未见报道。本研究通过对不同生育期的草地早熟禾与青海扁茎早熟禾的 POD 同工酶进行分析, 从生化水平上探讨其亲缘关系及遗传差异, 为该生态草种的深入研究及合理的开发利用提供依据。 1 材料与方法 供试材料试材草地早熟禾和青海扁茎早熟禾种子由青海省畜牧兽医科学院草原研究所提供。于 2010 年 10 月将材料播种于花盆, 各材料均设 3 次重复, 室内土培。于 2010 年 11 月和 12 月分别采取其健康幼叶和旗叶作为试验材料。 试验方法 样品制备分别称取草地早熟禾和青海扁茎早熟禾的叶片(幼 3 叶和旗叶)各 g ,洗净用滤纸吸干水分,剪碎置于预冷的小研钵中, 滴入 mL 提样缓冲液, 在冰浴中研磨匀浆, 移入离心管中, 10 000 r/min , 4℃,离心 15 min ,取上清液 mL 加入等量的样品处理液备用。 电泳采用聚丙烯酰***凝胶垂直平板电泳技术[9] , 分离胶浓度为 %