文档介绍：实验四:还原糖的测定——水杨酸法 1. 实验原理在氢氧化钠和丙三醇存在下,还原糖能将3,5-二硝基水杨酸中的硝基还原为氨基,生成氨基化合物。此化合物在过量的氢氧化钠碱性溶液中呈桔红色,在 540nm 波长处有最大吸收,在一定浓度范围内其吸光度与还原糖含量呈线性关系 2. 适用范围及特点此法适用于各类食品中还原糖含量的测定,具有准确度高、重现性好、操作简便、快速等优点, 尤其适用于大批样品的测定。 3. 实验试剂 3,5-二硝基水杨酸溶液: 称取 3 ,5 -二硝基水杨酸溶于少量水中,移入 1000mL 容量瓶中,加入 2mol/L 氢氧化钠溶液 325mL ,再加入 45g 丙三醇,摇匀, 冷却后定容到 1000mL 。 4. 测定方法准确吸取 0、2、3、4、5、6、 7mg/mL 的葡萄糖标准溶液各 1mL ,样液 2mL ,分别置于 25mL 比色管中,各加入 3,5-二硝基水杨酸溶液 2mL ,用蒸馏水补齐至 10mL 刻度线, 置沸水浴中煮 5min 显色,然后以流水迅速冷却,用水定容到 25mL ,摇匀。以空白调零, 在 540nm 处测定吸光度,绘制标准曲线,计算样品中还原糖的含量。 4. 结果计算还原糖( %)= A×V 定W 样×V 测× 100 其中: A——从标准曲线上求得的葡萄糖质量, mg V 定——样品溶液定容的体积, mL W 样——样品的质量, mg V 测——测定时的取样体积, mL