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心肌肥厚指标(共6页).doc

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心肌肥厚是心脏对慢性压力或容量超负荷产生的大鼠给予去氧皮质***加盐水,形成容量过负荷高血压心肌肥厚模型,属内分泌型(低肾素型)高血压肥厚型,以心脏容积增大为特征,属离心性肥厚状态。该模型建立所需时间较长,费用较大;为使大鼠血压升高,实验过程中给予1%***化钠。
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[910]
大鼠麻醉后开腹,分离腹主动脉和下腔静脉用血管夹阻断血流。用9号针头斜向上穿刺静脉壁,继续进针刺静—动脉联合壁。退出针头,9/0线缝合静脉壁的创口。松开血管夹,下腔静脉变红则证实造瘘成功。动静脉造瘘后,动脉血流入下腔静脉,回心血量增加,增加心脏容量负荷,最终导致心肌肥厚的发生。
[11、12]
,皮下注射每日2次,连续6周可引起左心室肥厚,这一作用与其激活肾上腺素受体,增加心肌细胞合成代谢以及Ca2+超负荷有关。
[14、15]
大量甲状腺素能提高人体基础代谢率,增强交感神经活动,增加心脏的负荷。机体高甲状腺素状态,可促进心肌细胞mRNA和蛋白质的合成,从而使心肌肥厚。-甲状腺素1mg/kg,连续7天。


在建立各种因素造成大鼠LVH模型基础上,急性处死大鼠,剖胸取出心脏,灌流装置为Langendorff装置,逆行恒压灌注,灌注压为85cmH2O,灌注液为Kreba-Hensele缓冲液。记录左心功能参数,包括左心室收缩压力(LVSP)、左心室舒张末期压力(LVEDP)、左心室内舒张期压力最大变化速率(-dp/dt/pmax)、左心室内压最大变化速率(±dp/dt/pmax)。测定结束后,可观察心肌肥厚情况,并观察心肌胶原网络重构或分离心肌细胞,测定心肌细胞Ca2+浓度等[6,16]。
[6]
无菌条件下取出生后2~4天SD大鼠心脏,将心室肌放入Hank’s液中冲洗3次后,剪成小块(约lmm2),%的胰酶在磁力搅拌器的搅拌下分散细胞,控制温度在37℃,每10分钟收集一次细胞,离心二次后将全部细胞置于含有10%胎牛血清和90%DEME培养基的100ml培养瓶中,送入二氧化碳培养箱(5%CO2和95%空气)中培养60~90分钟,根据差率贴壁法区别心肌细胞和非心肌细胞,并加入Bromodeoxyurine以防残留非心肌细胞的生长。将生长于培养板上静止了48小时的心肌细胞的培养液倒掉,加入不同浓度的刺激剂如ET,Ang
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Ⅱ,L-NAME(NO合酶抑制剂),N