文档介绍：食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法
1 主题内容与适用范围
本文规定了食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法。
本文适用于航空食品的检验。
2 设备和材料
吸管（1ml、10ml）、恒温培养箱（36±1℃、、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法
1 主题内容与适用范围
本文规定了食品中大肠菌群、粪大肠菌群和大肠杆菌检验方法。
本文适用于航空食品的检验。
2 设备和材料
吸管（1ml、10ml）、恒温培养箱（36±1℃、±℃）、冰箱、均质器、振荡器、平皿、稀释瓶、天平、显微镜等
3 培养基和试剂
月桂基硫酸盐胰蛋白月示（LST）肉汤、煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤、EC肉汤、伊红美蓝琼脂（EMB）、营养琼脂斜面、色氨酸肉汤、MR-PV 培养基、Korser氏枸掾酸盐肉汤、结晶紫中性红胆盐琼脂（VRBA）、Butterfield氏磷酸盐缓冲稀释液、生理盐水、革兰氏染色液、 Kovacs氏靛基质试剂、***红指示剂、Voges-proskauer（V-P）试剂、
4 样品制备
以无菌操作取有代表性的样品盛于灭菌容器内。如有包装，则用75%乙醇在包装开口处擦拭后取样。
制备样品匀液
以无菌操作取25g样品，放入装有225ml稀释剂的灭菌均质杯内，于8000r/min均质1-2min，制成1：10的样品匀液。如样品均质时间超过2min，应在均质杯外加冰水冷却。
稀释样品匀液
用10ml灭菌吸管准确吸取1：10的样品匀液10ml，放入装有90ml稀释剂的150ml稀释瓶中。迅速振摇，将样品混匀，制成1：100的样品匀液。
5 大肠菌群的测定
大肠菌群MPN值的测定
对每个样品，选择适宜的三个连续稀释度的样品稀释液。每个稀释度接种三管月桂基硫酸盐胰蛋白月示（LST）肉汤，每管接种1ml。
将接种管置于36±1℃的培养48±2h。
观察试管的产气情况：检查倒管内是否有气泡产生，记录在24h和48h内产气的LST肉汤管数。如所有LST肉汤管均未产气，则可报告为大肠菌群阴性；如有产气者，则进一步作证实试验。
大肠菌群的证实试验
将所有产气管用直径为3mm的接种环移种到煌绿乳糖胆盐（BGLB）肉汤管中。
置BGLB肉汤管于36±1℃的培养48±2h。
记录所有BGLB肉汤管的产气管数。
结果报告：按BGLB肉汤产气管数，查MPN表报告每克（毫升）样品中大肠菌群的MPN值。
6 粪大肠菌群测定
用接种环将所有48±2h内产气的LST肉汤管培养物移种于EC肉汤管中。
±℃水浴箱内，培养24±2h。水浴箱的水平面应高于肉汤培养基液面。℃℃不产气的产气肠杆菌或其他大肠菌群细菌作阳性和阴性对照。
记录EC肉汤管的产气情况。产气管为粪大肠菌群试验阳性；不产气管为粪大肠菌群试验阴性。
结果报告：按产气管数，查MPN表报告每克（毫升）样品中粪大肠菌群的MPN值。
7 大肠杆菌测定