文档介绍：实验六肠杆菌科的鉴别一、目的要求?熟悉大肠杆菌和沙门菌主要培养特性和常规微生物学诊断方法. 二、实验材料?菌种:大肠杆菌、沙门氏菌?培养基: ?麦康凯平板、三糖铁斜面、各类生化反应管(小生化管)等. ?器械:砂轮、试管架、接种环、接种针酒精灯、废报纸等. 肠杆菌科的鉴别(大肠杆菌&沙门菌) 肠杆菌科的生化试验 1、麦康凯琼脂平板(乳糖、胆盐、指示剂: 1% 中性红) 方法:划线,分解乳糖菌落变红色 2、三糖铁琼脂斜面(葡萄糖、蔗糖、乳糖、硫酸亚铁铵、指示剂: % 酚红) 方法:先划斜面再穿刺 3、糖分解试验微量发酵管:葡萄糖、乳糖、甘露醇、蔗糖方法:用接种针挑取菌种后接入发酵管内,用报纸包好口,置培养箱培养。发酵糖产酸:指示剂溴甲酚蓝由紫色黄色 4、吲哚(靛基质)试验培养基:蛋白胨水微量管原理:细菌分解蛋白质中的色氨酸产生吲哚,吲哚与对位二***氨基苯甲醛作用形成玫瑰吲哚而成红色。方法:接种针接种,培养 12-24 h 后,加入试剂显色 5、***红( MR )试验培养基:葡萄糖蛋白胨水原理:***红试验: 分解葡萄糖产生***酸,进一步分解为甲酸、乙酸、乳酸等使 pH 下降,含***红指示剂的培养基变红 6、 VP 试验:葡萄糖蛋白胨水原理:某些菌发酵葡萄糖产生***酸,***酸经多脱羧、氧化等反应生成二乙酰,其与蛋白胨中精氨酸胍基作用产生粉红色化合物 7、枸橼酸盐(柠檬酸盐)利用试验培养基: Simmon 氏枸橼酸钠微量发酵管原理:细菌若能以枸橼酸钠为唯一碳源,磷酸铵为唯一氮源,则可利用枸橼酸钠产生碳酸盐, 与利用铵盐产生的 NH 3反应,形成 NH 4 OH ,使培养基变碱, pH 升高,指示剂溴麝香草芬蓝由草绿色变为深蓝色。 8、脲酶培养基:尿素微量发酵管(指示剂:酚红) 原理:细菌分解尿素产生 2分子 NH 4,使 pH 升高, 指示剂变红。 9、硫化氢试验培养基:营养琼脂中含 FeSO 4的微量反应管原理:凡细菌能分解含硫氨基酸,产生 H 2S者, 其所产生的 H 2S会使培养基中的醋酸铅或 FeCl 3形成黑色的硫化铅或硫化铁。 10 、运动力试验培养基:半固体琼脂微量反应管方法:穿刺接种