文档介绍：关于免疫分析ok
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免疫分析方法—是研究免疫学的一种工具。是利用抗体和抗原在琼脂介质中扩散、泳动等反应特性进行的。
优点：
特异性强，分辨率高，应用较普遍
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改变免疫反应类型的一种物质。 ① 分类 有机：胞壁酸二肽、多糖类物质和福氏佐剂 无机：明矾 福氏佐剂公认较好，有明显的免疫刺激作用。
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免疫佐剂的作用
1）延缓抗原的释放，保护抗原不被水解，佐剂可延长抗原在体内滞留时间，避免频繁注射，有利于高亲和力抗体的产生；
2）活化巨噬细胞并促进巨噬细胞与T和B细胞的相互作用，从而对淋巴细胞有特异性加强刺激的作用；
3）佐剂吸附了抗原后，增加了抗原的表面积，使抗原易于被巨噬细胞吞噬；
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4）佐剂能刺激吞噬细胞对抗原的处理；
5）可刺激致敏淋巴细胞的分裂和浆细胞产生抗体。故免疫佐剂的作用可使无免疫原性物质变成有效的免疫原；
6）可提高机体初次和再次免疫应答的抗体滴变；
7）改变抗体的产生类型以及产生迟发型变态反应，并使其增强。
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佐剂的制备条件
1）增加抗原的表面积，并改变抗原的活性基团构 型，从而增强抗原的免疫原性；
2）佐剂与抗原混合能延长抗原在局部组织的存留时间，减低抗原的分解速度，使抗原缓慢释放至淋巴系统中，持续刺激机体产生高滴度的抗体；
3）佐剂可以直接或间接激活免疫活性细胞并使之增生，从而增强了体液免疫、细胞免疫和非特异性免疫功能；
4）良好的佐剂应具有无毒性或副作用低的特点。
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福氏佐剂（Freund’s adjuvant）分为：
不完全的和完全的福氏佐剂 前者是一种油包水的乳剂，即用羊毛脂或甘露糖醇单油酸酯（Arlacela）为乳化剂，加入等体积2％Tween 80的水溶液，则可提高乳剂的稳定性； 后者是在不完全福氏佐剂中加入杀死的分枝杆菌（如结核杆菌或卡介苗）制备而成的。
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② 福氏佐剂的作用
1）油包水乳化剂有助于促进免疫反应的进行。
2）部分保护不稳定抗原，使抗原在体内的吸收期延长，减少加强注射的次数。
3）分枝杆菌增加局部淋巴结的炎症反应，扩大免疫原性，促进高亲和力抗体的形成。
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（3）抗原的剂量及免疫途径
① 抗原的剂量： 抗原的剂量，对于首次免疫的动物，取决于是否用佐剂。
若不使用佐剂，把100微升至1毫升血清白蛋白注入兔体内，仅能引起微小的反应。
使用佐剂，可引起高效力的反应。对大多数动物，-10毫克/每公斤体重
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低剂量抗原有利于早期有选择地产生高亲和力抗体，而高剂量抗原将使动物产生免疫耐受性，导致选择缓慢甚至延长数个月。
抗原注射量太大，或者注射次数频繁是没有好处的，免疫原性好的抗原物质，一般经过2-3个月时间的免疫，即可达到高滴度的抗体效价。
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② 免疫途径及免疫间隔时间：
一般采取多点（6-8点）、少量（-）肌肉或皮下注射方法，均可获得最佳免疫效果。 若抗原量极有限时，则加完全佐剂采用多点（30-50点）注射法，可产生较好的免疫效果。
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免疫间隔时间通常为2-6周。
因为从第一次注射抗原到出现抗体血清的延滞期为1-30天。可溶性蛋白的延滞期需5-7天。之后，血清抗体的浓度则以指数速度增加，在9-11天达到最高值。
对普通抗原，在加强注射后9天，可采集血清；但也有的抗原在加强注射后，需要较长的时间才能达到最高值。
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从图看出，使用福氏佐剂作为抗原乳化剂比明矾好，使用明矾佐剂者又比不用佐剂的好。
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四、抗体的检测
抗体的检测：定性与定量分析。
定性分析抗体的方法：间接血凝法、反向间接血凝法和胶乳凝集法等。
定量分析抗体的方法：放射免疫沉淀法、酶联免疫吸附测定法（enzyme-linked immunosorbent assay，简称ELISA）、扩散法和火箭免疫电泳法等。
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酶联免疫吸附测定（ELISA）
1971年瑞典学者Engvail 和Perlmann，荷兰学者Van Weerman 和Schuurs 分别报道将免疫技术发展为检测体液中微量物质的固相