文档介绍：超高效液相色谱法测定苹果汁饮料中的展青霉素及其不确定度分析
摘要 为了在测量数据的处理、测定结果的表达和测量结果质量评定等方面与国际接轨,根据测量不确定度评定和表示(GB/T 27418-2017),食品安全国家标准 食品中相对湿度≤75%。
样品处理
参照GB -2016 食品安全国家标准 食品中展青霉素的测定中第二法高效液相色谱法进行。
色谱条件
色谱柱:C18柱(100 mm× mm, μm);流动相:乙腈+水(10∶90,体积比);检测波长:276 nm;流速: ml/min;柱温:35℃,进样量:10 μl。
2 结果与分析
数学模型
X=
式中,X为试样中展青霉素的残留量(ng/g);A为样液中展青霉素的色谱峰面积;cs为标准工作液中展青霉素的浓度(ng/ml);V为样液最终定容体积(ml);AS为标准工作液中展青霉素的色谱峰面积;m为最终样液所代表的试样量(g)。
不确定度的来源分析
从测定过程和确定的数学模型分析,展青霉素含量测定的不确定度主要来源于:标准物质U(S)、标准溶液重复进样Urel(AS)、样品峰面积的测定Urell(A)、样品称量Urel(m)、定容体积Urel(V)、样品处理操作过程Urel(P)的差异等几个方面。 不确定度计算公式
Urel(X)=[U(cs)/cs]2+[U(A)/A]2+[U(V)/V]2+[U(m)/m]2+[U(As)/As]2
即:UC2(X)rel=UC2(cs)rel+UC2(A)rel+UC2(V)rel+UC2(m)rel+UC2(As)rel
不确定度的评定
标准物质的不确定度 标准物质不确定度包含标准物质、标准储备液和标准工作液配制过程引入的不确定度。
(1)标准物质引入的不确定度评定。根据标准物质证书提供的信息,展青霉素胺的不确定度为±%,按正态分布考虑,包含因子k=3,属B类评定,则有相对标准不确定度为:
U标物=%/3=×10-4。
(2)标准储备液配制过程引入的不确定度评定。标准物质有仅1 mg,用5 ml(V1)分度吸量管(A级)取乙酸乙酯溶解,其溶液为200 μg/ml。再用2 ml(V2)分度吸量管(A级)取200 μg/ml溶液吹干用乙酸水溶液定容至100 ml,浓度为4 μg/ml。最后用1 ml(V3)分度吸量管(A级)取4 μg/ml溶液吹干用乙酸水溶液定容至100 ml,浓度为40 ng/ml。
该过程使用的玻璃量具,按照JJG 196-2006《常用玻璃量器检定规程》的要求,均有相应的最大容量允差,按矩形分布考虑,k=。标准储备液不确定度来源为:5 ml(V1)分度吸量管(A级)
由5 ml A级单标移液管引起的不确定度[U(V1)]:
①校准。A级5 ml单标移液管的容量允许误差为± ml,取k=,则U(V11)=/= ml;
②重复性。A级5 ml单标移液管读数重复性为± ml,取k=,则U(V