文档介绍：医学免疫学免疫学检测技术
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第一节 抗原或抗体检测
I. Detection of antigens or antibodies
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一、抗原-抗体反应的特点
Spe 火箭电泳： 单向免疫扩散 + 电泳 （抗原定量）
免疫比浊： 抗体 + 递增量抗原比浊（抗原定量）
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III ) Immunolabelling Techniques （三）免疫标记技术
标记物： 荧光素、酶、放射性核素、电子致密物质、化学发光物质
标记对象：抗原或抗体
用途： 定性、定量、定位
免疫荧光法（IFA ）
荧光素可双色；使免疫复合物呈荧光；可定性、定位
（1）直接荧光法 （2）间接荧光法：
荧光素一抗 荧光素二抗
对每种抗体作标记 不必标记每种抗体
特异 敏感
测Ag 测Ag/Ab
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免疫荧光法
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2. 酶免疫测定（EIA）: ELISA与酶免疫组化
（1）双抗体夹心法ELISA：查抗原
（2）间接法ELISA： 查抗体
（3）BAS-ELISA ： Biotin-Avidin-酶放大系统
（4）ELISPOT测定法：
__包被物 待测物 测定结果___
抗CK抗体 CK分泌细胞 单一CK
已知抗原 B细胞 特异B细胞
（5）酶免疫组化*
酶标抗体 + 组织/细胞（未知抗原） + 形态学检查
*免疫组化技术：可对抗原定性、定量、定位
酶免疫组化： HRP
免疫金银组化： 胶体金颗粒
免疫电镜技术： HRP、胶体金、铁蛋白
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双抗体夹心法、间接法ELISA
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间接法ELISA
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ELISA操作图
可调移液器
8孔道可调移液器
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3. 放射免疫测定（RIA）
常用 125I，测定微量物质
4. 化学发光免疫分析
常用 鲁米诺，测定超微量物质
5. 免疫印迹法（Western Blotting）
先做凝胶电泳将蛋白质分区
再将蛋白质转移至固相载体
后用酶免疫、放射免疫等技术加以测定
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第二节 免疫细胞的测定
一、淋巴细胞的分离与类型鉴定
（一）血细胞分离
外周血
密度梯度离心法
外周血单个核细胞（淋巴细胞+单核细胞）
吸附培养分离法
淋巴细胞
尼龙毛，抗CD3单抗，E花结
T细胞 B细胞
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（二）淋巴细胞鉴定
免疫荧光法
常用间接法测CD3/CD4/CD8、mIgM/mIgD
2. 磁珠分离法
如抗CD4抗体交联微珠可分离CD4与CD8
3. 流式细胞术（Flow Cytometry, FCM）
可分析细胞大小、核型、表面分子（多种荧光标记）
检测各类免疫细胞及其比率
白血病、淋巴瘤的免疫学分型
细胞分选
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二、淋巴细胞功能测定
（一）T细胞功能测定
1. T细胞增殖试验：