文档介绍：关于蛋白质分子量测定方法研究进展
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其他方法
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SDS-PAGE凝胶电泳
聚丙烯酰***凝胶电泳技术是实验室进行蛋白质研究中最常用的技术，兼有电泳和分子筛的双
Ve=K1—K2logMW
（K1、K2为常数，MW为分子量）
从公式可以看出，目标样品的流出体积与分子量对数成线性关系。在实际操作过程中，选取标准品与样品同时通过凝胶柱，通过已知标准品的流出体积和分子量可以计算出曲线中的K1、K2值，再根据已知的曲线方程和样品流出体积计算样品的分子量。
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凝胶渗透层析法
优点：操作简单，设备简单，样品用量少，周期简单，条件温和，一般不引起生物活性的改变。
缺点：应用具有一定的局限性，在pH6—8的范围内，线性关系比较好，但在极端pH时，一般蛋白质有可能因变性而偏离。糖蛋白在含糖量超过5%时，测得分子量比真实的要大，铁蛋白则与此相反，测得的分子量比真实的要小。
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质谱法
1906年，Thomson发明了质谱技术，最初只是用于无机化学中的同位素分析，直至20世纪40年代末才发展成为有机质谱。近年来，生物质谱技术取得了突飞猛进的发展，（ESI-MS）及基质辅助激光解吸电离质谱技术（MALDI-MS）的贡献最为突出。
可准确测定分子量
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（ESI-MS）
原理：电喷雾离子化质谱技术（ESI-MS）是在毛细管的出口处施加一高电压，所产生的高电场使从毛细管流出的液体雾化成细小的带电液滴，随着溶剂蒸发，液滴表面的电荷密度逐渐增大，最后液滴崩解为大量带一个或多个电荷的离子，致使分析物以单电荷或多电荷离子的形式进入气相的质谱技术。ESI-MS测定蛋白质大分子是根据一簇多电荷的质谱峰群，通过解卷积的方式计算得到蛋白质的分子量，由于ESI-MS可以产生多电荷峰，因此使得测试的分子质量范围大大扩大。
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（ESI-MS）
电喷雾是一种离子化方法，可以用作质谱仪的离子源
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（ESI-MS）
多电荷使得样品谱图复杂
荷质比：
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（ESI-MS）
优点：
（1）对样品的消耗少，不会造成样品的大量浪费；
（2）对样品分子质量测试灵敏度、分辨力和准确度都相当高；
（3）能够方便地与多种分离技术联用，如毛细管电泳、高效液相色谱等，是解决非挥发性、热不稳定性、极性强的复杂组分化合物的定性定量的高灵敏度检测方法。
缺点：
对样品纯度要求高，且会形成多电荷的质谱峰群，难以分辨，使得结果分析较为困难。
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（MALDI-MS）
原理：基质辅助激光解吸电离质谱技术（MALDI-MS）是将待测物悬浮或溶解在一个基体中，基体与待测物形成混晶，当基体吸收激光的能量后，均匀传递给待测物，使待测物瞬间气化并离子化。
将它与经典的脉冲化工作方式的飞行时间质谱仪（TOF）直接联用，即我们常听到的基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF-MS）。TOF的原理是离子在电场作用下加速飞过飞行管道，根据到达检测器的飞行时间不同而被检测即测定离子的质荷比（M/Z）与离子的飞行时间成正比，检测离子。
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（MALDI-MS）
优点：（1）同ESI-MS 一样对样品的消耗很少；
（2）MALDI-MS 的最高分辨率不断提高，甚至超过ESI-MS；
（3）有利于对复杂混合物的分析，且能忍受较高浓度的盐、缓冲剂和其他难挥发成分，降低了对样品预处理的要求；
（4）MALDI-TOF 质谱对生物大分子分子量的测定范围是所有测试技术中最广。
缺点：在与高效液相色谱、毛细管电泳等分离设备的联用时，目前只能采取离线的方式，致使分析结果的重复性较差，与MALDI-MS 本身高精密度的特性不匹配。
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其他方法
除了以上几种目前实验室常用的测定方法，还有一些现在在实验室一般不太使用的方法，包括粘度法，渗透压法，辐射失活法，超速离心沉降法，光散射法等。
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粘度法是指通过测定样品溶液的粘度，从而计算样品的的分子量的方法。一定温度条件下，高聚物稀溶液的粘度与其分子量之间呈正相关性，随着分子量的增大，聚合物溶液的粘度增大。通过测定高聚物稀溶液粘度随浓度的变化，即可计算出其