参苓白术颗粒中人参皂苷的含量测定方案.docx

文档介绍：参苓白术颗粒中人参皂苷的含量测定方案
一、设计背景
随着医药行业的不断发展，更多的研究者在研究中医药剂中的含量时，选择利用实验及结合医学要点分析其特点及功效，其中参苓白术颗粒属中药类也有“参苓白术丸”，具有健脾胃祛湿的作用，临床主要Re、Rg1（厂家：上海麦克林，批号：**********）；
（3）99%甲醇（厂家：里斯（天津）医药化学技术有限公司，批号：2012071201）；
（4）蒸馏水（自制）。
由于人参皂苷属于混合溶液，其中包含Re、Rg1，为净化其溶液试验，对于样品利用正丁纯粹取溶液进行高效液色谱分析，再采用大孔树胶柱进行净化，净化后收取每30mL注入色谱仪检查，结果去除杂质后，再利用70%乙醇分别制成Re、Rg1洗脱完成。
（二）色谱检测条件
：乙腈-%磷酸溶液20:80
：203nm
：30℃
：色谱柱（YMC-Pack ODS-A）(×200mm，4μm)
:
（三）溶液的制备

精密称取人参皂苷Rg1、Re对照品适量，分别加入50%，待用。

取参苓白术颗粒约14g，精密称重，加入100mL甲醇，加热回流3h，药渣挥去溶剂，连同滤纸筒移入具塞锥形瓶中，加入甲醇溶液50 ml，加热回流1 h，放冷，滤过，用少量甲醇洗涤药渣及容器3次，合并洗液和滤液，蒸干，残渣加水50 ml使溶解，用水饱和的正丁醇提取4次（20 ml,20 ml,10 ml,10 ml），合并正丁醇提取液，正丁醇液置旋转蒸发仪中减压蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至10 ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，定量转移至容量瓶中，稀释至刻度，摇匀，即得。

按照处方工艺，将空白溶液与人参皂苷Rg1、Re对照品制成空白溶液制剂，照“对照品溶液的制备”项下方法操作，即得。
（四）方法学考察

取对照品溶液、供试品溶液和空白溶液各10μl，分别注入液相色谱仪中，照色谱条件测定。如果供试品溶液在与对照品溶液相同保留时间处有色谱峰，空白对照溶液无干扰峰，
则说明方法专属性好。

精密吸取同一对照品溶液，连续进样10次，按上述色谱条件测定峰面积，记录色谱图，计算平均值和RSD值。根据RSD值的结果，确定仪器的精密度是否良好。

精密吸取“对照品溶液的制备”、、、、 ml分别置10 ml量瓶中,各加流动相稀释至刻度,摇匀,即得。以进样量10µL注入液相色谱仪,测定峰面积，以进样量为横坐标( X)，峰面积为纵坐标( Y)，进行回归处理，。

取供试品溶液，置于室温下，分别于配制后0、1、2、4、8、12、24h取10μL进样，注入色谱仪中，进行分析，记录峰面积，体现供试品溶液在24h的稳定性状况。

取供试品细粉适量, 共6份, 按“供试品溶液的制备”项下方法，平行制备6份供试品溶液, 按选定的色谱条件分别进样测定并计算含量。要求人参皂苷Rg1、Re %。
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