文档介绍：主要内容?第一节免疫细胞及其亚群的检测(自学) ?第二节免疫分子的检测(重点) ?一、抗原、抗体的检测?(一)抗原- 抗体反应的特点(自学) ?(二)抗原- 抗体反应的影响因素(自学) ?(三)抗原- 抗体反应的类型和检测方法(重点) ?(自学) ?(自学) ?(自学) ?(重点) ?(自学) ?二、细胞因子的检测(自学) ?第三节免疫学检测的临床应用第二节免疫分子的检测?(三)抗原抗体反应的类型和检测方法?? (1)免疫荧光技术(3)放射免疫测定法(2)酶免疫测定法………. Ag-Ab + 标记技术。用以检测 Ag 或 Ab 的一种试验方法。标记: 标记: 荧光素、酶、放射性同位素等。标记后的 Ag 或 Ab 仍有原有的生物学活性。特点: 特点: 敏感性高、特异性强、应用范围广,可定性、定量、定位。 4、免疫标记技术?免疫荧光技术?免疫酶测定法?放射免疫测定法?发光免疫分析?免疫胶体金技术?免疫印迹技术 Ag荧光素 Ag 放射性同位素酶荧光显微镜酶标检测仪射线测量仪化学发光物、金属颗粒等用荧光素、放射性同位素、酶、金属颗粒及化学(或生物)发光剂等作为追踪物,标记抗体或抗原进行的抗原抗体反应??免疫标记技术 Ag硝酸纤维素膜和醋酸纤维素膜利用吸附载体作为固相进行抗原抗体反应吸附载体吸附载体聚苯乙烯微量反应板(酶标板) Ag 聚苯乙烯微量反应板(酶标板) 封阻/封闭( block ) 包被( coat ) Ag Ag 荧光素: 异硫氰酸荧光素( FITC ) --------- 黄绿色荧光四乙基罗丹明( RB200 ) ----------- 橙色荧光四甲基异硫氰酸罗丹明( TMRITC ) --橙红色待检标本(固定在玻片上) +已知荧光抗体→洗去游离的荧光 Ab →干燥后,荧光显微镜下观察。用途:病毒感染的细胞、携带某种特异性 Ag 的细胞的检测。 a、直接荧光法问题思考: 直接法会给我们的检测工作带来什么不方面? 检测多种 Ag 需制备多种相应的荧光抗体标记。用来检测标本中未知的 Ag 。检测 Ag 。未标记 Ab+ 待检 Ag (未知) →(冲洗) +荧光标记抗 Ab →冲洗、干燥、荧光显微镜下观察。 b、间接荧光法优点:敏感性高,制备一种荧光标记抗 Ab 即可对多种 Ab- Ab 系统进行检测。缺点:易出现非特异性荧光。