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文档介绍

文档介绍:分子生物学实验报告
学 院:
专业:
姓名:
学号:
分子生物学实验报告一
实验名称:一、基因DNA提取及电泳检测
专业班级: 5min
4℃ hold
3. 电泳
%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,取8µµl上样缓冲液混合,用移液枪加入凝胶孔。×TBE溶液,电泳结束后用凝胶呈像系统观察,并拍照记录。
六,实验数据,结果分析
七,讨论、心得与体会;
分子生物学实验报告三
实验名称: 三、条浒苔总RNA的提取和反转录
专业班级: 姓名:
学号: Email:
实验日期:
同组者:
一,实验名称:PCR扩增
二,实验目的和要求:


三,实验仪器,设备与材料
10µl移液枪、100µl移液枪、条浒苔、RNA提取液、PCR仪
四,实验原理
RT—PCR是一种将cDNA合成与PCR技术结合分析基因表达的快速灵敏的方法,主要用于对表达信息进行检测或定量分析,还可以用来检测基因表达差异而不必构建cDNA文库克隆cDNA。RT-PCR的模板可以为总RNA或poly(A)+选择性RNA。逆转录反应可以使用逆转录酶,以随机引物、oligo(dT)或基因特异性的引物(GSP)起始。在实际应用中,RT—PCR又常常分为一步法RT—PCR和两步法RT—PCR。
五,实验步骤
①液氮研磨藻体,
②向离心管中加入1ml TRIzol,充分振荡;
③12000rmp/10min 取上清
④加200微升***仿,充分振荡15秒,静置2分钟
⑤12000rpm/15分钟,取上清
⑥加500微升异丙醇,混匀,静置10分钟,12000rpm/10分钟;
⑦去上清,加1ml 75%酒精,混匀,7500rpm/5分钟;
⑧晾晒RNA
⑨30微升DEPC处理水溶解RNA;
%琼脂糖凝胶电泳检测PCR产物,取8µµl上样缓冲液混合,用移液枪加入凝胶孔。×TBE溶液,电泳结束后用凝胶呈像系统观察,并拍照记录。

1按下列组成配制反转录反应液:
10XRNA PCR Buffer 1µl
MgCl2 (25mM) 2µl
DNTP Mixture (10mM) 1µl
AMV Reverse Transcriptase XL (5U/µl) µl
RNase Inhibitor (40U/µl) µl
Oligo Dt-3sites Adaptor Primer