实验八-十微生物的分离纯化.ppt

文档介绍：实验八-十微生物的分离纯化

牛肉膏蛋白胨培养基、土豆培养基、油脂培养基、淀粉培养基、移液管、三角瓶、无菌水、接种环、酒精灯、土壤悬液、无菌培养皿、涂棒、恒温培养箱等。

，制备土壤实验八-十微生物的分离纯化

牛肉膏蛋白胨培养基、土豆培养基、油脂培养基、淀粉培养基、移液管、三角瓶、无菌水、接种环、酒精灯、土壤悬液、无菌培养皿、涂棒、恒温培养箱等。

，制备土壤悬液：1g土稀释到10-6；
称取5克土样放入装有45ml无菌水和玻璃珠的三角瓶中，连续摇动30分钟，依次稀释至10-6
倒平板→划线→培养→挑单菌落→接种移植→保存
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右手持盛培养基的三角瓶置火焰旁边，用左手将试管塞或瓶塞轻轻地拨出，试管或瓶口保持对着火焰；然后左手拿培养皿并将皿盖在火焰附近打开一缝，迅速倒人培养基约15ml，加盖后轻轻摇动培养皿，使培养基均匀分布在培养皿底部，然后平置于桌面上，待凝后即为平板。

。右手拿无菌涂棒平放在平板培养基表面上，将菌悬液先沿一条直线轻轻地来回推动，使之分布均匀然后改变方向沿另一垂直线来回推动，平板内边沿处可改变方向用涂棒再涂布几次。
培养后可观察有无孤立菌落生长，每一孤立菌落即为一纯种细菌。一般病原菌的菌落数少于杂菌，故在分离培养时，应力求出现较多的孤立菌落，以提高病原菌检出率。

土豆培养基板于28 ℃倒置培养24天，牛肉膏蛋白胨培养基、土豆培养基、油脂培养基、淀粉培养基于37 ℃倒置培养24小时后观察

，并按下列公式进行计算:
每毫升中菌落形成单位（cfu）=
同一稀释度三次重复的平均菌落数×
稀释倍数×5
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