文档介绍：实验四无菌操作技术与细菌的简单染色
实验四 无菌操作技术与细菌的简单染色
（一）无菌操作技术（用接种环转接菌种）
5、塞棉塞
6、灼烧接种环
7、作标记
使用记号笔在试管口部注明菌种名称、接种日期和接种人姓名。
实验四实验四无菌操作技术与细菌的简单染色
实验四 无菌操作技术与细菌的简单染色
（一）无菌操作技术（用接种环转接菌种）
5、塞棉塞
6、灼烧接种环
7、作标记
使用记号笔在试管口部注明菌种名称、接种日期和接种人姓名。
实验四 无菌操作技术与细菌的简单染色
五、实验操作
（二）细菌的简单染色
1、涂片
在载玻片的中央滴一小滴蒸馏水，用接种环以无菌操作从大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和金黄色葡萄球菌斜面上挑取少许菌苔于水滴中，混匀并涂成薄膜（直径约1cm）。
注意事项：1）载玻片要洁净无油迹；
2）滴生理盐水或取菌不宜过多；
3）涂片要涂抹均匀，不宜过厚。
实验四 无菌操作技术与细菌的简单染色
（二）细菌的简单染色
2、干燥
自然干燥
3、固定
涂面朝上，通过火焰2~3次。
固定的目的：1）使细胞质凝固变性，固定细胞形状；2）使菌体牢固附着在载玻片上。
注意：热固定温度不宜过高（以玻片背面不烫手为宜），否则会改变甚至破坏细胞形态。
实验四 无菌操作技术与细菌的简单染色
（二）细菌的简单染色
4、染色
滴加染液覆盖涂菌部位即可。
染色时间：吕氏碱性美蓝 ；
草酸铵结晶紫或齐氏石炭酸复红 1min
5、水洗
倒去染液，用自来水冲洗，直至图片上留下的水无色为止。
注意：水洗时，不要直接冲洗涂面，而应使水从载玻片的一端留下，水流不宜过急、过大，以免涂片薄膜脱落。
实验四 无菌操作技术与细菌的简单染色
五、实验操作
（二）细菌的简单染色
6、干燥
用吸水纸吸取多余的水分，自然干燥或电吹风吹干。
7、镜检
涂片必须完全干燥后才能用油镜观察。
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