文档介绍：实验五实验五激素对血糖浓度的影响及血糖浓度的测定实验性质: 实验性质: 综合性综合性实验:激素对血糖浓度的影响--------------- 邻甲苯胺法测血糖一、目的及要求 。 。 。二、二、原理原理: : 3H 2O 冰乙酸, 沸水浴 1)葡萄糖 5-羟甲基-2- 呋喃甲醛 2)5-羟甲基-2- 呋喃甲醛+ 邻甲苯胺西夫氏碱(蓝绿色) 3)同样处理标准管与样品管三、试剂:(略) 三、试剂:(略) 四、操作步骤: 实验分组: 2 大组/实验室,即胰岛素组和肾上腺素组。 4 或5 小组/ 大组,即胰前和胰后组或肾前和肾后组。 1、取预先饥饿 14-16 小时的正常家兔 2只, 称重。 2、从耳缘静脉采血:剪毛→二甲苯棉球擦拭→干棉球擦干→碘酒、酒精消毒→ 7号针头穿刺取血→放入加有抗凝剂(草酸钠: 2mg / ml )的烧杯中→摇匀。 3、1只家兔肌肉注射胰岛素( 5U / Kg , 规格: 5U / ml ),另一只家兔皮下注射肾上腺素( mg / 只,规格: mg / ml )。 4、30分钟后,分别从耳缘静脉取血或心脏取血。 5 5、无蛋白血滤液的制备: 、无蛋白血滤液的制备: 取短试管 4只,各加胰前、胰后、肾前、肾后等抗凝血 ml ,用滤纸擦净粘附于吸管尖端外表面的血液,再加入 5% 三氯醋酸 ,边加边摇,充分混匀。待血液由鲜红色变为暗红色(或酱油色), 3000rpm 离心 5min ,上清即为无蛋白血滤液。 6 6、取试管、取试管 6 6 支,编号,按下表操作(单位: 支,编号,按下表操作(单位: ml ml ) ) H 2 O —————标准液— ————胰前无蛋白血滤液—— ———胰后无蛋白血滤液——— ——肾前无蛋白血滤液———— —肾后无蛋白血滤液————— 邻甲苯胺试剂 空白管空白管标准管标准管胰前管胰前管胰后管胰后管肾前管肾前管肾后管肾后管各管分别混匀,同时置于 100 ℃水浴加热8分钟,流水冷却。 630 nm 进行比色, 以空白管校正零点,读取各管光密度。五、五、计算计算血糖(mg % ) = 测定/ 标准× × 1 × 1 / × 100 = 测定/ 标准× 100