文档介绍：植物生物技术
愈伤组织的诱导
外植体的选择
①大小要适宜,不宜太小
②同一植物不同部位的外植体，其细胞的分化能力、分化条件及分化类型有相当大的差别。通常植物胚与幼龄组织器官比老化组织、器官更容易去分化，产生大量的
影响器官建成的因素2——培养基成分
植物激素的浓度、比例
乙烯
碳源的种类和浓度
影响器官建成的因素3——培养环境条件
培养基的物理状态——液固状态、渗透压
培养基的化学性质——pH
光照——光照时间、光照强度、光照周期（连续/间隔）、光质
温度
第四节 体细胞胚胎建成
体细胞胚胎建成：又叫体细胞胚胎发生，指诱导体细胞形成体细胞胚 ，并进一步再生出完整植株的过程。
胚状体(embryoid )的概念
胚状体(体细胞胚, Somatic embyo)：离体培养中，没有经过受精过程，但经过了胚胎发育过程形成的胚的类似物。
体细胞胚的发生途径
1、从外植体直接发生
2、经胚性愈伤组织发生
3、悬浮培养细胞发生
体细胞胚的发生过程:
体细胞胚的发育
一个正常胚的发育一般要经过球形、心形、鱼雷形和子叶形的胚胎发育时期，最后发育成完整的小植株。但有些植物如柑橘胚培养胚状体的发育可能缺乏某一形态时期，这种胚状体有时称为畸形胚。
又叫胚状体，是组织培养中起源于一个非合子细胞，经过胚胎发生和胚胎发育过程形成的具有双极性的胚状结构 。
从胚状体的这个概念可以看出：
①胚状体不同于合子胚，因为它不是***细胞融合的产物；
②胚状体不同于孤雌胚或孤雄胚，因为它不是无融合生殖的产物；
③胚状体不同于组织培养中通过器官发生途径形成的茎芽和根，因为它的形成须经历与合子胚相似的发育过程，而且成熟的胚状体是一个双极性结构。
体细胞胚
体细胞胚发育再生成植株有两个明显的特点：
一是体细胞胚具有双极性（double polarity）；
二是体细胞胚形成后与母体的维管束系统连系
较少，即出现所谓的生理隔离（physiological
isolation）现象。
影响体细胞胚发生的因素
1、生长素（2,4-D）有利于诱导体细胞胚的形成，但是抑制体细胞胚的发育。
2、培养基中的氮源影响体细胞胚的发生频率。
3、不同基因型间体细胞胚的形成能力有差异。
影响体细胞胚胎发生和发育的因素 ——外植体
物种、种、甚至品种间
外植体的年龄
幼龄状态的组织比老龄组织易于诱导产生胚状体
愈伤组织的继代次数、时间
影响体细胞胚胎发生和发育的因素 ——培养基成分
金属离子——K+ 、Fe2+ 、Zn 2+ 、Cu 2+ 、Co 2+ 、Mn 2+ 等对胚状体的发生或发育有促进作用 。
氮素——氮含量、氮源形态，搭配使用NH4-和NO3-较为方便 、有效。
生长素——生长素的存在可能对体细胞胚的形成有抑制作用。
以胡萝卜体细胞胚的诱导为例。
影响体细胞胚胎发生和发育的因素 ——培养的环境条件
培养基的渗透压
pH
光照
温度
培养瓶内气体成分（O2、CO2等）
第五节 人工种子
植物组织培养再生植株的途径
人工种子的概念
将植物离体培养产生的体细胞胚包埋于含有营养成分和保护功能的物质中，在适宜条件下发芽出苗的颗粒体。（Kamada,1985）
任何一种繁殖体，无论是在涂膜胶囊中包裹的、裸露的或经过干燥的，只要能够发育成完整的植株，均或称之为人工种子。
（陈正华等，1998）
人工种子的优点
（无性繁殖植物）。
。
。
，可以节省制种用地，且不受季节限制。
，可避免移栽困难，实现机械化操作，便于储藏和运输。
人工种子的生产流程
1、繁殖体的人工诱导与生产增殖
2、繁殖体的筛选和预处理
胚状体；
微芽；
原球茎
后熟培养；
人工筛选；
脱水干燥
3、人工种子的包埋
繁殖体的预处理
人工胚乳：
人工种皮:海藻酸钠
明