文档介绍：第五章 色谱分析基础
第一节
色谱法概述
色谱法的特点、分类和作用
色谱基本参数与流出曲线的表征
色谱一般分离过程与基本关系式
Fundamental of chromatograph analysis
Generalization of chromatograph analysis
2017/11/11
色谱法的特点、分类和作用
混合物最有效的分离、分析方法。
俄国植物学家茨维特在1906年分离叶绿素,
色谱原型。
色谱法是一种分离技术。
混合物分离过程:试样中各组分在称之为色谱分离柱中的两相间不断进行着的分配。
一相固定不动,称为固定相。
另一相是携带试样混合物流过固定相的流体(气体或液体),称为流动相。
(动画)
2017/11/11
色谱法
当流动相中携带的混合物流经固定相时,其与固定相发生相互作用。由于混合物中各组分在性质和结构上的差异,与固定相之间产生的作用力的大小、强弱不同,随着流动相的移动,混合物在两相间经过反复多次的分配平衡,使得各组分被固定相保留的时间不同,从而按一定次序由固定相中流出。
(动画)
与适当的柱后检测方法结合,实现混合物中各组分的分离与检测。
两相及两相的相对运动构成了色谱法的基础。
2017/11/11
(1)气相色谱:流动相为气体(称为载气)。
按分离柱不同可分为:填充柱色谱和毛细管柱色谱。
按固定相的不同又分为:气固色谱和气液色谱。
2017/11/11
(2)液相色谱
流动相为液体(也称为淋洗液)。
按固定相的不同分为:液固色谱和液液色谱。
离子色谱:液相色谱的一种,以特制的离子交换树脂为固定相,不同pH值的水溶液为流动相。
2017/11/11
(3)其它色谱方法
薄层色谱和纸色谱:
比较简单的色谱方法。
凝胶色谱法:测聚合物分子量分布。
超临界流体色谱:CO2流动相。
高效毛细管电泳:
九十年代快速发展、特别适合生物试样分析分离的高效分析仪器。
2017/11/11
色谱一般结构流程
色谱法分类图示
2017/11/11
(1)分离效率高
复杂混合物,有机同系物、异构体,手性异构体。
(2) 灵敏度高
可以检测出μg·g-1(10-6)级甚至ng·g-1(10-9)级的物质量。
(3) 分析速度快
一般在几分钟或几十分钟内可以完成一个试样的分析。
(4) 应用范围广
气相色谱:沸点<400℃的各种有机或无机试样的分析。
液相色谱:高沸点、热不稳定、生物试样的分离分析。
不足之处:
被分离组分的定性较为困难。
2017/11/11
色谱基本参数与流出曲线的表征
无试样通过检测器时,检测到的信号即为基线。
(1)时间表示的保留值
保留时间(tR):组分从进样到柱后出现浓度极大值时所需的时间;
(动画)
死时间(tM):不与固定相作用的气体(如空气)的保留时间;
调整保留时间(tR '):tR'= tR-tM
2017/11/11
(2)用体积表示的保留值
保留体积(VR):
VR = tR×F0
F0为柱出口处的载气流量,
单位:m L / min。
死体积(VM):
VM = tM ×F0
调整保留体积(VR'):
V R' = VR -VM
(动画)
2017/11/11