文档介绍：红细胞凝集试验（HA）与红细胞凝集抑制试验（HI）用疫苗按一定免疫程序进行免疫接种是控制鸡病流行的主要途径之一，这种观点已被广大养殖户接受并引起足够重视。但鸡群免疫抗体的产生及维持时间受到鸡群免疫应答能力、所用疫苗种类、免疫方法、免疫次数、2—3天。，，此即1%红细胞悬液。现用现配。
被检血活：-1ml,静置或离心，待血活析出后备用。
吸管活洁液的配制：使用1%勺稀硫酸溶液。水10公斤，硫酸100毫升，将硫酸慢慢倒入水中，不断搅拌，操作时必须戴手套，口罩。
：重铭酸钾79克，水1000ml,硫酸100ml,将重铭酸钾磨碎，溶解丁水中，然后慢慢加入硫酸100ml,不断搅拌，切不可将重铭酸钾水溶液倒入硫酸中，以防爆炸，操作时必须戴手套，口罩。
：为灭菌的生理盐水。
三、实验过程：
原理：某些病蠹（如新城疫、减蛋、流感）能够与鸡红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象。这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血活所抑制，即红细胞凝集抑制试验（HI）。
应用：1、检测血活中的抗体水平，确定免疫时机。2、免疫后及时监测，确认免疫效果。3、辅助诊断病蠹性疾病。
包括血凝（HA试验、抗原校正和血凝抑制（HI）试验三步：
（一）血凝（Hf试验：采用96孔V型反应板，测定抗原效价1、首先用微量移液器向反应板的每孔加生理盐水25微升。
2、用微量移液器吸取待测抗原25微升丁第一孔中并挤压6次混合，后吸出25微升至第2孔，依次倍比稀释到第11孑L,弃去25微升。
3、微量移液器再吸取1咐细胞悬液依次加入各孔，每孔25微升。
4、置丁微量振荡器上振荡1分钟。
5、室温静置30分钟后观察结果。
6、结果观察：将反应板倾斜成45度角，沉丁孔底的红细胞沿着倾斜面向下呈线状流动者为沉淀，表明红细胞未被或不完全被病蠹凝集;如果孔底的红细胞铺平孔底，凝成均匀薄层，倾斜后红细胞不流动，说明红细胞被病蠹所凝集。能使鸡红细胞完全凝集的抗原的最高稀释倍数，称为该抗原滴度红细胞凝集效价。即沉淀的前一孔即为该抗原的效价。如彩图1所示第8孔红细胞为完全凝集，说明该抗原效价为1:256。
表LHA试验
孔号
1
2
3
4
5
a
7
3
9
10
11
12
病斐稀
释倍数
1：2
1；4
1
1
1：32
1
1
1：255
1：S12
1UO24
1：跑4日
对照
彩图1：
图1抗原效价为1:256
（二）4单位抗原校正：
1、根据抗原效价结果配制相应比例的抗原稀释液：即4单位抗原。
例：上图1:抗原效价为1:256,HI试验时，25微升抗原稀释液内须含4个凝集单位，则应将抗原作256/4=64倍稀释。，。
2、首先用微量移液器向反应板的第二孔至第六孔加生理盐水25微升。第一孔不加。
3、用微量移液器吸取4单位抗原25微升分别加入第一孔、第二孔中，从第二孔开始挤压6次混合，后吸出25微升至第3孔，依次倍比稀释到第5孑L,弃去25微升。
4、用微量移液器再吸取1咐细胞悬液依次加入1-6孔，每孔25微升。
5、丁微量振荡器上