文档介绍：液相色谱法
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第七章 液相色谱(liquid chromatography) §7-1 概述 （3）液相色谱的分类
广义地讲，固定相为平面状的纸色谱法和薄层色谱法也是以液体为）液相色谱仪的工作过程
输液泵将流动相以稳定的流速（或压力）输送至分析体系，在色谱柱之前通过进样器将样品导入,流动相将样品带入色谱柱,在色谱柱中各组分因在固定相中的分配系数或吸附力大小的不同而被分离，并依次随流动相流至检测器，检测到的信号送至数据系统记录、处理或保存。
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第七章 液相色谱 (liquid chromatography) §7-2 液相色谱仪 （4）液相色谱仪的基本组成系统
（高压输液系统：储液器、混合室、高压泵、过滤器、压力脉动阻力器、梯度洗脱装置等组成。核心：高压输液泵）
：进样器（微量注射器或六通阀）
：色谱柱
：示差折光、紫外-可见、荧光、极谱、红外等。
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第七章 液相色谱 (liquid chromatography) §7-2 液相色谱仪 （5）高压泵
高压输液泵是液相色谱仪的关键部件，其作用是将流动相以稳定的流速或压力输送到色谱系统。对于带在线脱气装置的色谱仪，流动相先经过脱气装置再输送到色谱柱。输液泵的稳定性直接关系到分析结果的重复性和准确性。
通常要求高压泵具有：流量可调、耐高压、液流稳定、死体积小等特点。
输液泵按输出液恒定的因素分恒压泵和恒流泵。对液相色谱分析来说，输液泵的流量稳定性更为重要，这是因为流速的变化会引起溶质的保留值的变化，而保留值是色谱定性的主要依据之一。因此，恒流泵的应用更广泛。
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第七章 液相色谱 (liquid chromatography) §7-2 液相色谱仪 （6）梯度洗脱装置
在进行多成分的复杂样品的分离时，经常会碰到前面的一些成分分离不完全，而后面的一些成分分离度太大，且出峰很晚和峰型较差。为了使保留值相差很大的多种成分在合理的时间内全部洗脱并达到相互分离，往往要用到梯度洗脱技术。
在液相色谱中流速（压力）梯度和温度梯度效果不大，而且还会带来一些不利影响，因此，液相色谱中通常所说的梯度洗脱是指流动相梯度，即在分离过程中改变流动相的组成或浓度。
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第七章 液相色谱 (liquid chromatography) §7-2 液相色谱仪 （7）进样器
进样器是将样品溶液准确送入色谱柱的装置，分手动和自动两种方式。
进样器要求密封性好，死体积小，重复性好，进样时引起色谱系统的压力和流量波动要很小。除使用自动进样装置外，现在的液相色谱仪所采用的手动进样器几乎都是耐高压、重复性好和操作方便的六通阀进样器，实现了常压下不停流进样。
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六通进样阀可分为定子和转子两部分，共有6个口，故称为六通进样阀。转子通过扳手调节，可以分别处于“装样”和“进样”两个位置。图中a为进样阀处于“装样”位置的情况，此时流动相直接进入色谱柱，样品注入口与样品环连接，用微量进样针将一定体积的样品溶液从样品注入口注入，装于样品管内。当将扳手扳至“进样”位时，进样阀的流路发生了改变，流动相通过样品管，将注入的样品带入色谱柱进行分析。六通进样阀具有使用方便，进样量准确等优点。样品环有10µl、20µl、50µl等不同容积，可以选配。样品环不仅可以用来贮液，也可用来测量样品溶液的体积。将样品环装满后，进样，进样量即为样品环的容积，此种进样方式称为“满环进样”或“定量环进样”。用定量环进样精密度好，在使用外标法时，应使用此种操作方式。
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六通进样阀结构如图所示：
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第七章 液相色谱 (liquid chromatography) §7-2 液相色谱仪 （8）色谱柱
色谱柱是实现分离的核心部件，要求柱效高、柱容量大和性
能稳定。柱性能与柱结构、填料特性、填充质量和使用条件有关。 色谱柱： 是将色谱填料填充到色谱柱管中所构成的。
色谱柱管： 内部抛光的不锈钢管。色谱往长一般10～30cm，
内径2～5mm。，长250mm。
色谱柱的填充
干法填充：在硬台面上铺上软垫，将空柱管上端打开垂直放在软垫上，用漏斗每次灌入50～ 100mg填料，然后在台面上墩10～ 20次。
湿法填充：使用专门的填充装置进行填充。
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第七章 液相色谱