文档介绍：环磷酸腺苷（cAMP）含量试剂盒说明书
HPLC法 50管/48样
请客户正式实验前做预实验确定样本稀释倍数！注意事项必读！
测定意义：
环磷酸腺苷（环磷酸腺苷（cAMP）含量试剂盒说明书
HPLC法 50管/48样
请客户正式实验前做预实验确定样本稀释倍数！注意事项必读！
测定意义：
环磷酸腺苷（Adenosine 3’，5’-cyclic monophosphate，cAMP）是一种重要的具有生物活性的环核苷酸类物质，广泛存在于生物体内。cAMP作为生命信息传递的“第二信使”，不仅参与机体多种酶的代谢过程，对细胞的分裂、分化和发育起着重要的调节作用，而且还可调节基因转录和翻译，影响蛋白质合成。
测定原理：
cAMP在254 nm下有吸收峰，可以利用高效液相色谱法测定其含量。
需自备的实验用品：
高效液相色谱仪、低速离心机、溶剂抽滤装置、氮吹仪、涡旋振荡器、针头式过滤器（水系，50个，）、滤膜（水系和有机系各1个， μm）、C18柱（耐水， ×250 mm）、可调式移液器、样品瓶（50个，2 mL）、内衬管（50个，放置在样品瓶内用于微量样品进样）、甲醇（色谱级，200 mL）和超纯水。
试剂的组成和配制：
试剂一：粉剂一支，25 ℃保存；
试剂二：液体60 mL×1瓶，4 ℃保存；
试剂三： mg×1支，-20 ℃保存。
实验前的准备工作：
1、将超纯水1000 mL和甲醇200 μm的滤膜抽滤，以除去溶剂中的杂质，防止堵塞色谱柱。（注：超纯水用水系滤膜抽滤，甲醇用有机系滤膜抽滤）。
2、流动相的配制：量取900 mL超纯水， g试剂一，混匀溶解。将甲醇和加入试剂一的超纯水按照10：90的比例配成流动相，可取100 mL甲醇和900 mL超纯水混合，混匀。
3、将配好的流动相超声30分钟，以脱去溶剂中的气泡，防止堵塞色谱柱。
cAMP的提取：
组织的处理： g组织，加入1 mL试剂一，冰浴匀浆， mL有盖离心管中，涡旋1 min，50 ℃水浴1 h并且震荡3~4次， 8000g离心10 min， mL离心管中，氮气吹干， mL超纯水，涡旋震荡溶解，用针头式过滤器过滤后待测。
标准品的配制：
在试剂三中加入1 mL超纯水，配成1 mg /mL 母液，将母液用超纯水分别稀释成200 μg/mL、150μg/mL、100μg /mL、50 μg /mL和10 μg /mL的cAMP标准品溶液。针头式过滤器过滤后待测。
cAMP含量测定操作步骤：
1.