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生物秀实验频道——努力做您的实验助手!  实际上区别不大。器官培养(organ culture)是将活体中器官或器官一部分取出,在体外生长、
生存,并使其保持器官原有的结构和功能特征的培养。其特点是:培养的器官在合适的条件
下能生长和分化,存活数周或 1 年。其培养物用肉眼及显微镜观察均受限,只能用组织切片
的方法观察或用透射电镜、扫描电镜观察。此种培养方法与细胞或组织培养有区别。
细胞或组织培养既是一种技术,也是 一门科学。细胞或组织培养研究的对象是活的细胞,
研究的条件可以人为地控制,研究的样本可以达到较好均一性,研究的内容便于观察、检测
和记录,研究的范围比较广泛,研究的费用相对较经济等优点。因此被培养的组织或细胞是
非常好的实验对象,被广泛应用于医学研究、生物技术、基因工程研究领域。随着细胞培养
技术和其他技术的发展,医学和生物学研究将会取得更大的成就。
中国生物科学论坛【生物秀论坛】  3  ——努力做您的实验助手!  / 
第一章 细胞培养基本知识
一、培养细胞的形态与结构
不同组织的细胞,由于内部构造不同,生理功能不同,所处环境条件不同,因而形态上
表现为多种多样,如呈圆形、椭圆形、正方形、柱形、扁平形、梭形、星形和多边形等。另
外,也有些细胞如吞噬细胞没有固定的形态。组织培养细胞形态结构与体内细胞基本相同。
然而,由于细胞的生长方式不同,在大体形态及某些细微结构方面各有一定差异。如呈悬浮
生长时,不论细胞原来源于体内何种类型细胞,因生长在液体环境中,胞内渗透压高于周围
液体环境,因此,胞体基本呈圆形。呈贴附于支持物上生长的细胞,开始为圆形,很快过渡
成扁平形,并逐渐恢复至原先的细胞形态。如来源于皮肤及其衍生物、乳腺、肝、消化道上
皮等组织的细胞,由上皮性肿瘤(鳞状细胞癌)等的培养的细胞均呈上皮样,上皮细胞形态为
扁平的多角形,胞质近中央处有圆形的细胞核。细胞紧密相靠、互相衔接成片,极性不明显。
起源于中胚层的细胞,体外培养似成纤维细胞型,如纤维结缔组织、平滑肌、心肌、血管内
皮、人胚肺等的细胞体外培养形态类似在体内生长的成纤维细胞,具有长短不等的数个细胞
突起,因而多呈纤维状、梭形,少数呈现不规则三角形或扇形,核为卵圆形,位于靠近胞质
的中央。细胞排列为漩涡状、放射状或似栅栏状。
在一般显微镜下直接观察体外培养的细胞,细胞功能健康活跃时,细胞呈现均质而透明
的,结构极不明显。用相差显微镜可看清细胞的轮廓和内部结构。细胞有 1~2 个核仁。用固
定染色法和特殊技术可显示细胞器等结构。细胞功能状态不良时,细胞轮廓会增强,反差增
大。在胞质中出现颗粒、脂滴和空泡等,反差很大的暗色小颗粒是变形的线粒体,这些是细
胞代谢不良的表现。培养细胞的形态与细胞在体外生存时间的长短、细胞种类有一定关系。
初代培养的正常二倍体细胞,除大体形态外,其构造和生物学性状与原体内细胞极相近,细
胞均质性和透明度都很强。若随体外培养时间延长及反复传代,细胞会出现轮廓增强、核仁增
多,甚至出现双核或多核等变化。如细胞发生转化,则形态变化更大。
培养细胞的超微结构需用电镜才能观察到。细胞膜分三层结构,由双层类脂分子组成,
双层分子间嵌有蛋白质分子。细胞膜向外凸出形成泡状、叶状、丝状和指状突起。细胞膜含
有丰富的酶类,膜表面分布着具有特殊功能的受体。细胞膜具有通透性和交换扩散、主动运
转代谢物的功能。细胞膜下 胞质区中有微丝、微管构 成的骨架系统(cytoskelet on system, CSS), 
正常培养细胞中的微丝和微管走行有一定方向性,细胞转化后走行紊乱,被视为一项检测的
标志。胞质中还有线粒体、溶酶体、高尔基复合体、中心体和内质网等(见书后照片 1~3)。
线粒体的形态结构在培养