文档介绍：原理
超氧化物歧化酶〔SOD〕
超氧化物歧化酶〔superoxide dismutase，SOD〕是一种能专一地去除超氧离子自由基〔O2-〕的金属酶，它具有抗衰老、抗辐射、抗炎及抗癌等作用因而在医药、化装品及食品工业等方面有了广泛的应用收值一次，整个操作在4 min内完成，计算出每分钟A325的增值，此即为邻苯三酚自氧化率。。
[2] 酶活力测定
样1、样2及样3中SOD酶活力测定操作与[1]根本一致，参加邻苯三酚前，先参加一定体积的SOD样液，蒸馏水那么减少相应的体积，同理测其光吸收值，计算加酶后邻苯三酚自氧化率。
[3] 酶活性单位计算
根据酶活性单位的定义，按以下公式计算酶活性：
单位活性〔U/ml〕= (Ao-Am)/A0×100%50% ×反响液总体积数×样液稀释倍数样液体积
其中，Ao为邻苯三酚自氧化率；Am加酶后邻苯三酚自氧化率。
总活性(U)＝单位活性×酶原液总体积
[4] 蛋白质含量测定〔考马斯亮蓝G-250法〕：
⑴ 标准曲线的制作：取6支具塞试管，编号，按下表参加试剂：
试剂
试管编号
1
2
3
4
5
6
蛋白质标准液〔ml〕
0
蒸馏水〔ml〕
0
考马斯亮蓝G-250〔ml〕
5
5
5
5
5
蛋白质含量〔μg〕
0
20
40
60
80
100
盖上塞子，摇匀。注意各管振荡程度尽量一致。放置10分钟，在595nm波长下比色测定光吸收值，比色应在1小时内完成。以牛血清白蛋白含量〔ug〕为横座标，光吸收值为纵坐标，绘出标准曲线。
⑵ 样品中蛋白含量的测定
将待测的SOD溶解并稀释到一定浓度，取3支试管，分别参加50μl、100μl、100μl的样1、样2和样3，再分别参加950μl、900μl和900μgl蒸馏水，3支试管中都参加5ml考马斯亮蓝G-250试剂，其余操作与标准曲线制作相同。
⑶ 蛋白质含量计算
根据所测样品提取液的光吸收值，在标准曲线上查得相应的蛋白质含量(μg)，计算其浓度。
[5] 结果处理
利用考马斯亮蓝G-250法测定每毫升酶原液蛋白质毫克数。
比活力〔U/mg〕=单位活力（U/ml）单位蛋白质浓度（mg/ml）=总活力（U）总蛋白质（mg）
将测得的数据或计算结果填入下表：
提纯步骤
酶液总体积ml
蛋白质
mg/ml
酶活性
U/ml
总活性
U
比活性
U/mg
回收率
(%)
纯化倍数
除血蛋白上清
热变性后上清
丙酮沉淀后的
SOD同工酶鉴定〔聚丙烯酰胺凝胶法〕
[1] 样品制备
取一定浓度〔约SOD 〕酶液，酶液与40%蔗糖按1：1的体积比例配成样品液，备用。
[2] 制备凝胶
(1)用蒸馏水清洗两块玻璃板，两条玻璃间隔条和一把梳子，凉干备用。
(2)组装玻璃板。平放大玻璃板，盖上有凹槽的小玻璃，用4个蝴蝶夹左右两边夹住玻璃的两条边固定这个组装系统，左右两边封到3～4 cm高即可。
(3)