文档介绍：液相色谱仪器
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（一）色谱起源
石油醚
碳酸钙颗粒
色素
色谱
组分产生气泡，影响流量的稳定性，如果有大量气泡，泵就无法正常工作。
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液相色谱流程图
输液泵
进样器
色谱柱
柱温箱
检测器
贮液瓶
（流动相）
数据处理
计算机控制系统
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自动进样器
手动进样器
自动进样的特点：
1、超高的进样精度
2、超快的进样速度
3、可以进行批进样
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液相色谱流程图
输液泵
进样器
色谱柱
柱温箱
检测器
贮液瓶
（流动相）
数据处理
计算机控制系统
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作用:分离样品
分离原理:
(正相和反相)
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填料: 多孔硅胶以及以硅胶为基质的键合相、氧化铝、有机聚合物微球（包括离子交换树脂）、多孔碳等
填料粒度: 一般为3,5,7,10μm
内径: 2-5mm（，国内有4mm和5mm）
柱长: 10-30cm
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柱的发展方向：
更短,柱长3-10cm
填料颗粒更小,粒径2-3µm
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色谱柱的使用注意点
1）避免柱压过高（根据不同的柱子要求不同）
2）柱温在40℃左右,一般不超过50 ℃
3）一般ODS柱流动相PH使用范围为2～
4) 流动相有机溶剂比例过低, 柱效下降快
5）避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
6）应逐渐改变溶剂的组成，特别是反相色谱，不应直接从有机溶剂改变为全部是水，反之亦然。
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色谱柱的使用注意点
7）样品进样前必须经过微孔膜过滤
8）经常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。如果用缓冲溶液作为流动相，分析结束时必须先用纯水冲洗10分钟，再用甲醇-水冲洗，绝不能让缓冲溶夜留在柱子中过夜。
9）使用保护柱可延长柱子寿命。保护柱应经常更换。
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柱温箱
柱温控制的优点：
1、控制温度，保证分析结果重现性
2、升高温度，降低了流动相的黏度，降低柱压，保证色谱系统的稳定性。
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液相色谱流程图
输液泵
进样器
色谱柱
柱温箱
检测器
贮液瓶
（流动相）
数据处理
计算机控制系统
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检测器是HPLC仪的三大关键部件之一。其作用是把洗脱液中组分定量转变为电信号。
HPLC的检测器要求：
灵敏度高
噪音低（对温度、流量等外界变化不敏感）
线性范围宽
重复性好
适用范围广
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紫外可见检测器（UV/VIS）
二极管阵列检测器（PDA）
示差检测器（RID）
电导检测器（CDD）
荧光检测器（RF）
电化学检测器（L-ECD）
质谱检测器（MS）
蒸发光散射检测器（ELSD）
常用检测器
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紫外可见检测器
原理：基于被分析组分对特定波长紫外光的选择性吸收
优点：1）对温度和流速变化不敏感
2）可用于梯度分析
缺点：仅适用于测定有紫外吸收的物质
紫外可见检测器
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样品池
参比池
光电管
光电管
Ein
Ein
Ein
光栅
D2 / W 灯
l
Eout
紫外可见检测器
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示差折光检测器
原理：连续测定流通池中溶液折射率变化以测定
试样各组分浓度。
优点：通用型检测器
缺点：1）对温度和压力变化敏感
2）不能用于梯度分析
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原理：基于被分析组分发射的荧光强度进行检测
优点： 1）灵敏度极高，是最灵敏的检测器之一