文档介绍：第四章发酵工业的无菌技术
灭菌与消毒的区别
灭菌:用物理或化学方法杀死或除去环境中所有微生物,包括营养细胞、细菌芽孢和孢子
消毒:用物理或化学方法杀死物料、容器、器皿内外的病源微生物。
培养基灭菌的目的
1,在发酵过程中夹杂其它杂菌造成的后果:
生产菌和杂菌同时生长,生产菌丧失生产能力;
在连续发酵过程中,杂菌的生长速度有时会比生产菌生长得更快,结果使发酵罐中以杂菌为主;
杂菌及其产生的物质,使提取精制发生困难
杂菌会降解目的产物;
杂菌会污染最终产品,杂菌会污染最终产品;
发酵时如污染噬菌体,可使生产菌发生溶菌现象。
2,工业上具体措施包括:
(1)使用的培养基和设备须经灭菌;
(2)好氧培养中使用的空气须除菌处理;
(3)设备应严密,发酵罐维持正压环境;
(4)培养过程中加入的物料应经过灭菌;
(5)使用无污染的纯粹种子。
3,培养基灭菌的目的
杀灭培养基中的微生物,为后续发酵过程创造无菌的条件。
4,培养基灭菌的要求
(1)达到要求的无菌程度(10-3)
(2)尽量减少营养成分的破坏,在灭菌过程中,培养基组分的破坏,是由两个基本类型的反应引起的:
培养基中不同营养成分间的相互作用;
对热不稳定的组分如氨基酸和维生素等的分解。

,因杂菌的消耗而损失,造成生产能力的下降。
2. 杂菌也会产生代谢产物,这就使产物的提取更加困难,造成得率降低,产品质量下降。
3. 有些杂菌会分解产物,使生产失败。
4. 杂菌大量繁殖后,会改变反应液的pH值,使反应异常。
5. 如果发生噬菌体污染,生产菌细胞将被裂解,使生产失败。

杂菌的检查与类型判断
显微镜检查法
平板划线培养
肉汤培养
发酵过程的异常观察法:溶解氧水平异常变化、通过传感器或取样分析观察PH的变化、尾气中CO2异常变化
污染的原因分析
种子带菌、空气带菌、设备渗漏、灭菌不彻底、操作失误和技术管理不善
分析污染杂菌的种类
分析污染杂菌的时间
分析污染杂菌的程度
杂菌污染的途径及其预防
种子带菌及其预防:

过滤空气带菌及其防治
设备的渗漏或死角染菌及其防治
培养基灭菌不彻底导致染菌及其防治
操作不当造成染菌
噬菌体染菌及其防治

工业上具体措施包括:
(1)使用的培养基和设备须经灭菌;
(2)好氧培养中使用的空气应经除菌处理;
(3)设备应严密,发酵罐维持正压环境;
(4)培养过程中加入的物料应经过灭菌;
(5)使用无污染的纯粹种子。
灭菌的方法
(1)化学法
化学药品灭菌法
(2)物理法
干热灭菌法
湿热灭菌法
射线灭菌法
过滤除菌法
火焰灭菌法