第六章 液相色谱分析法法 PPT课件.ppt

文档介绍：第三章高效液相色谱分析
一、高效液相色谱仪 HPLC
二、高效液相色谱法的特点
三、流程及主要部件
第一节高效液相色谱的特点与仪器
一、液相色谱仪器
二、高效液相色谱法的特点
特点:高压、高效、高速
高沸点、热不稳定有机及生化试样的高效分离分析方法。
三、流程及主要部件


(1) 高压输液泵
主要部件之一,压力:150~350×105 Pa。
为了获得高柱效而使用粒度很小的固定相(<10μm),液体的流动相高速通过时,将产生很高的压力,因此高压、高速是高效液相色谱的特点之一。
应具有压力平稳、脉冲小、流量稳定可调、耐腐蚀等特性
(2)梯度淋洗装置
外梯度:
利用两台高压输液泵,将两种不同极性的溶剂按一定的比例送入梯度混合室,混合后进入色谱柱。
内梯度:
一台高压泵, 通过比例调节阀,将两种或多种不同极性的溶剂按一定的比例抽入高压泵中混合。
(3) 进样装置
流路中为高压力工作状态,
通常使用耐高压的六通阀进样装置,
其结构如图所示:
(4) 高效分离柱
柱体为直型不锈钢管,内径1~6 mm,柱长5~40 cm。发展趋势是减小填料粒度和柱径以提高柱效。
(5) 液相色谱检测器
a. 紫外检测器
应用最广,对大部分有机化合物有响应。
特点:
灵敏度高;
线形范围高;
流通池可做的很小(1mm × 10mm ,容积 8μL);
对流动相的流速和温度变化不敏感;
波长可选,易于操作;
可用于梯度洗脱。
b. 光电二极管阵列检测器
紫外检测器的重要进展;
光电二极管阵列检测器:1024个二极管阵列,各检测特定波长,计算机快速处理,三维立体谱图,如图所示。