实验一 还原糖和总糖含量的测定.docx

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实验一 还原糖和总糖含量的测定

试验一 复原糖和总糖含量的测定
〔3,5-二硝基水杨酸比色法〕
一．目的










实验一 还原糖和总糖含量的测定

试验一 复原糖和总糖含量的测定
〔3,5-二硝基水杨酸比色法〕
一．目的
； ； 。 二．原理
在碱性的条件下，复原糖与3,5-二硝基水杨酸共热，3,5-二硝基水杨酸被复原为3-氨基-5-硝基水杨酸〔棕红色物质〕,复原糖的量与棕红色物质颜色深浅的程度成必须的比例关系，在540nm波长下测定棕红色物质的消光值，查对标准曲线并计算，便可分别样品中复原糖和总糖的含量。
三． ：
〔1〕25ml刻度试管 〔2〕玻璃漏斗 〔3〕三角瓶 〔4〕101ml容量瓶3个 〔5〕刻度吸管〔1ml,2ml,3ml〕 〔6〕恒温水浴 〔7〕沸水浴 〔8〕电子天平 〔9〕分光光度计 ；
〔1〕1mg/ml葡萄糖标准液 〔2〕3,5-二硝基水杨酸试剂 〔3〕碘碘化钾溶液 〔4〕酚酞指示剂 〔5〕6ml/L HCI 〔6〕6ml/L NaOH ：食用面粉 四．操作步骤
：取7支25ml刻度试管，编号，按如下操作。 操作工程 葡萄糖标准液〔ml〕 蒸馏水〔ml〕 管 号 0 1 2 3 4 5 6 0 2 1 3,5-二硝基水杨酸〔ml〕 吸光度〔A540〕 将各管摇匀，在沸水中加热5min，取出后马上放入盛有冷水的烧杯中冷却至室温，再以蒸馏水定容至25min，用试管塞塞住试管口，颠倒混匀。在540nm波长下，用0号试管调零，分别读取1~6号管的吸光度。以吸光度为纵坐标，葡萄样毫克数为横坐标，绘制标准曲线。







第 3