文档介绍：
微生物实验报告
猪场生病,微生物鉴定

动物微生物及免疫学试验报告
一、试验目的
〔一〕驾驭一般造就基的制备原理及要求，驾驭造就基酸碱度的测定，熟识一
般造就基的制备过程和各种器皿及中指将平皿揭
开约20左右，然后将接种环前端插入小口旋转一下后，再用划线接种的方法接种到一个血清平板上。
〔3〕用记号笔在平板底部作好日期、操作人员、部位等标记，并将平板倒放。
以此方法，分别接种十二指肠、胃粘膜、肝脏于血清平板上，各接种2个血清平板。
3、造就：将接种好的血清平板倒扣放入37℃造就箱中，反向造就24小时。注：划线接种时尽量划开，以保证长出单个菌落，且划线时接种环应尽量倾斜，以免划破造就基〔后同〕；待接种完毕后熄灭无菌操作台内酒精灯，关闭好无菌操作台窗口，翻开无菌操作台内的紫外灯。。
〔四〕细菌纯造就
1、菌落特征判定
待粗造就的细菌造就24小时后，取出用放大镜视察记录单个小菌落的形态特征并用试验报告纸记录好，并在平板底部上做好视察标记，其形态特征包括大小、形态、菌落边缘、外表构造、隆起度、潮湿度、透亮度、颜色等。

猪场生病,微生物鉴定
2、取单个菌落进展革兰氏染色镜检
〔1〕取干净的载玻片，用记号笔在其一面做好正反面标记，再在载玻片另一
面中心滴上一小滴蒸馏水。
〔2〕将接种环在火焰上灭菌，待冷却后，在酒精灯旁从标记的单个小菌落中
取少许细菌置于蒸馏水中混匀〔同时盖好平板倒扣置于一旁〕，，再在酒精灯火焰上方以钟摆速度通过固定好细菌，待冷却进展染色。
〔3〕先滴加草酸结晶紫溶液染色1~2min，再水洗；然后滴加革兰氏碘液溶液
染色1~2min，再水洗；随后滴加95%的酒精脱色30~60s，再水洗；最终滴加稀释的品红进展复染30~60s，再水洗；待枯燥或吸水纸吸干后镜检。
〔4〕将枯燥的载玻片放在1010倍油镜下，滴加一滴松柏油进展镜检，视察其
形态特征，判定细菌的种属。
3、细菌接种造就
〔1〕消毒灭菌：操作人员先用消毒水清洗手或戴好试验手套，再用消毒水对

无菌操作台内桌面及用酒精灯外焰对待用器械进展火焰灭菌。
〔2〕接种：右手持灭过菌的接种环，左手持平板，并用拇指、食指及中指将
平皿揭开约20左右，然后将接种环插入揭开的平板口内蘸去一下镜检标记的小菌落，再用划线接种的方法接种到一个血清平板、LB平板或麦康凯平板上。并用记号笔在平板底部作好日期、操作人员、菌种、部位等标记，将平板倒放。
〔3〕将接种好的平板倒扣放入37℃造就箱中，反向造就24小时。
注：油镜用完后应马上清理物镜上的松柏油；划线接种时尽量划开，以保证长出单个菌落；待接种完毕后熄灭无菌操作台内酒精灯，关闭好无菌操作台窗口，翻开无菌操作台内的紫外灯。。
〔五〕菌液的制备
猪场生病,微生物鉴定
1、镜检：用革兰氏染色法在1010倍油镜下镜检，视察并记录是否为纯造就的细菌。
2、分装液体造就基：先对无菌操作台及须要运用的器械进展消毒灭菌，然后用钳子揭开一个空试剂瓶，用倾倒的方法在酒精灯旁从液体造就基大试剂瓶中分装于空试剂瓶内，并马上盖上液体造就基大试剂瓶瓶塞。
3、接种：右手持接种环，用火焰对其进展灭菌，待冷却后，取出纯造就的平板，在无菌操作台内酒精灯旁，蘸去少许细菌，左手倾斜液体造就基，将接种环，伸入液体造就基内搅动，然后取出对接种火焰环灭菌，并用灭菌的包装纸捆绑好后，用记号笔做好相应标记，置于一旁。

4、造就摇菌：将接种好的液体造就基置于水浴造就箱中造就24小时。注：分装一个造就基就接种一个造就基