文档介绍：基于网络药理学方法的二至丸治疗肝肾阴虚型崩漏作用机制研究
吉兰芳 王梦梦 崔树娜 摘要:目的 筛选二至丸治疗肝肾阴虚型崩漏的主要活性成分,预测其作用的关键靶点及信号通路,建立多成分-多靶点-多通路的网络模型,从分子水平探讨其作o on, were regulated. Conclusion Erzhi Pills achieves the function of haemostatic, hormonal regulation and immune regulation by affecting the vascular function, neuroendocrine, glycolipid metabolism, inflammation and immune.
Keywords: Erzhi Pills; network pharmacology; metrorrhagia; liver-kidney yin deficiency; action mechanism
崩漏指經血非时暴下或淋漓不净,多发生于青春期和绝经过渡期女性。青春期少女天癸初至,肾气未充,肝失濡养,或绝经过渡期妇女天癸将绝,肾精亏虚,肝失调达,均易形成肝肾阴虚证。肝肾阴虚型崩漏的主要临床表现为经血非时而下,伴腰膝酸软、头晕耳鸣,或烦躁易怒、五心烦热、潮热盗汗,或舌红、苔少,脉弦细数。本病相当于现代医学的异常子宫出血,国际妇产科联盟(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)将其定义为月经的周期频率、规律性、经期和出血量4项指标中任一项不符合正常标准、源自子宫腔的出血[1-2],如经间期出血、功能失调性子宫出血等。目前西医治疗该病以性激素为主,但不良反应大且药物依赖性强,病情容易反复。 二至丸出自明代王三才《医便》,由女贞子(酒蒸)、墨旱莲各等份组成,其性平和、偏凉,功效补肝益肾、滋阴止血,为平补肝肾之良剂,临床用于治疗少女肾气未充、绝经过渡期妇女天癸将绝的肝肾阴虚型疾病[3],然而,目前尚缺乏关于二至丸治疗肝肾阴虚型崩漏的物质基础和分子机制研究。近年来,网络药理学方法被广泛应用于中医药研究领域,在阐述中药及其复方治疗作用机制中显示独特优势。本研究通过多个数据库联用检索和文献挖掘,筛选二至丸的主要活性成分并进行成分靶点预测,同时检索得到肝肾阴虚证崩漏相关的靶点,分析成分-疾病的交集靶蛋白相互作用关系。并对靶点基因功能及信号通路进行分析,构建二至丸治疗肝肾阴虚型崩漏的成分-靶点网络,进行网络拓扑学分析,从而揭示其作用的分子机制。
1 资料与方法
活性化合物筛选
二至丸由女贞子和墨旱莲组成,临床常水煎口服。本研究通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP,)检索,以口服生物利用度(OB≥30%)和類药性(DL≥)为条件筛选,得到女贞子和墨旱莲中符合条件的候选化合物,再结合国内外文献挖掘[4-5],筛选二至丸有效化学成分。
化合物靶点查询
通过以下2个途径获得化合物靶点:①以筛选得到的化合物名称为关键词,检索CTD数据库(/),整理其作用靶点;②在HIT数据库(/)中,以化合物名称为关键词进行检索,整理其蛋白靶点后,利用Uniprot数据库(/)进行归一化和标准化命名,整合出靶点,与前者合并去重,剔除非人源靶蛋白后获得二至丸调控的靶蛋白,建立中药-成分-靶点数据库。
疾病基因查询
通过PubMed数据库(. /)查询“崩漏”“异常子宫出血”的标准化表达,分别为metrorrhagia、AUB。分别以“metrorrhagia”和“AUB”为关键词,检索GeneCards数据库(/),将得到的基因进行整合,作为崩漏疾病基因。
参照《中医妇科学》[6]和《中药新药临床研究指导原则(试行)》[7]崩漏的相关内容拟定肝肾阴虚型崩漏辨证标准:①非月经期出现异常子宫出血;②腰膝酸软、头晕耳鸣;③烦躁易怒、五心烦热、潮热盗汗;④舌红、少苔、脉弦细数。以上①必备,兼有其余项即可辨证。通过GeneCards数据库(https://www. /)依次查找“soreness and weakness of waist and