文档介绍：师范大学远程教育学院
生物学实验报告
报告题目
培养基的制备与灭菌
姓
名
刘
伟
学
号
专
业
生物科学
批次 /层次
指导教师
学****中心
基的分装
根据不同需要，可将已配好培养基分装入试管或三角瓶内，分装时注意不要使培养基沾污管口或瓶口，造成污染。如操作不小心，培养基沾污管口或瓶口时，可用镊子夹一小块脱脂棉，擦去管口或瓶口的培养基，并将脱脂棉弃去。
1．试管的分装
取一个玻璃漏斗，装在铁架上，漏斗下连一根橡皮管，橡皮管下端再与另
一玻璃管相接，橡皮管的中部加一弹簧夹。分装时，用左手拿住空试管中部，
并将漏斗下的玻璃管嘴插入试管内，以右手拇指及食指开放弹簧夹，中指及无
名指夹佐玻璃管嘴，使培养基直接流入试管内。装入试管培养基的量视试管大
小及需要而定，若所用试管大小为 15×150 mm时，液体培养基可分装至试管高
度 1／4 左有为宜；如分装固体或半固体培养基时，在琼脂完全融化后，应趁热
分装于试管中。用于制作斜面的固体培养基的分装量为管高 1／5(约 3—4mI)，半固体培养基分装量为管高的 1／ 3 为宜。
2．三角瓶的分装
用于振荡培养微生物时，可在 250 m1 三角瓶中加入 50 m1 的液体培养基；若用于制作
平板培养基用时，可在 250 m1 三角瓶中加入 150ml 培养基，然后再加入 3g 琼脂粉 (按 2％计算 )，灭菌时瓶中琼脂粉同时被融化。
（四）棉塞的制作及试管、三角瓶的包扎
为了培养好气性微生物，需提供优良通气条件，同时为防止杂菌污染，则必须对通入试管或三角瓶内空气预先进行过滤除菌。通常方法是在试管及三角瓶口加上棉花塞等。
1．试管棉塞的制作
4 / 7
制棉塞时，应选用大小、厚薄适中的普通棉花一块，铺展于左手拇指和食指扣成的团孔上，用右手食指将棉花从中央压入团孔中制成棉塞．然后直接压入试管或三角瓶口。也可借用玻璃棒塞入，也可用折叠卷塞法制作棉塞。
制作的棉塞应紧贴管壁，不留缝隙，以防外界微生物沿缝隙侵入，棉塞不
宜过紧或过松，塞好后以手提棉塞，试管不下落为准。棉塞的 2／3 在试管内， 1 ／3 在试管外。目前也有采用硅胶塞代替棉塞直接盖在试管口上。
将装好培养基并塞好棉塞或硅胶塞的试管捆成一捆，外面包上一层牛皮纸。
用记号笔注明培养基名称及配制日期，灭菌待用。
2．三角瓶棉塞制作
通常在棉塞外包上一层纱布，再塞在瓶口上。有时为了进行液体振荡培养加大通气量，则可用 8 层纱布代替棉塞包在瓶口上，目前也有采用硅胶塞直接盖在瓶口上。
在装好培养基并塞好棉塞或包扎八层纱布或盖好硅胶塞的三角瓶口上，再包上一层牛皮纸并用线绳捆好，灭菌待用。
（五）培养基的灭菌
将上述培养基以 ，l21℃， 20min 高压蒸气灭菌。
灭菌过程：
加水：首先将内层锅取出，再向外层锅内加入适量的水，使水面没过加热蛇管，与三角搁架