大肠杆菌.ppt

文档介绍：大肠杆菌
±℃
IMVIC
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营养琼脂斜面18-24h
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法国标准化协会（AFNOR）认证
美国农业部（USDA）认证
美国食品和药品管理局（US大肠杆菌
±℃
IMVIC
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营养琼脂斜面18-24h
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法国标准化协会（AFNOR）认证
美国农业部（USDA）认证
美国食品和药品管理局（US FDA）认证
美国食品安全与检测机构（USDA FSIS）认证
日本食品安全法规标准分析方法
北美国家认证
加拿大健康保护协会认证
澳大利亚和新西兰食品安全认可方法
波兰标准化委员会（PKN）认证
智利农业部（SAG）认证
中国的GB和SN即将发布实施
国
际
官
方
方
法
3M测试片法检测食品中大肠菌群和大肠杆菌
3M PetrifilmTM 大肠杆菌/大肠菌群测试片的检测原理
-葡萄糖苷酶
四唑翁指示剂 （tetrazolium）
-半乳糖苷酶
薄膜
粘合剂＋指示剂
冷水可溶性凝胶
标准培养基＋冷水可溶性凝胶
粘合剂
印有格子的纸片
大肠菌群及大肠杆菌3M Petrifilm 检测法
接种1ml样品匀液到每张PetrifilmTM大肠菌群测试片
计数红色带气泡的菌落
报告大肠菌群数
36C1C
检 样
25g(mL）样品+ 225mL稀释液
只检测大肠菌群
大肠杆菌和大肠菌群同时检测
24 h2h
10倍系列稀释
接种1ml样品匀液到每张PetrifilmTM大肠杆菌/大肠菌群测试片
计数蓝色带气泡的菌落
报告大肠杆菌数
36C1C
24 h2h或48 h2h
计数蓝色带气泡和红色带气泡的菌落
报告大肠菌群数
含有改良的VRB培养基
目标菌落为红点带气泡
36 1C , 24 2 h
培养时叠放片数小于20
计数范围15-150
AOAC官方方法
3M PetrifilmTM 大肠菌群测试片
24 h得出大肠菌群数
肉、家禽和海鲜，24 h得出大肠杆菌数
其它食品，48 h得出大肠杆菌数
E. coli O157表现为大肠菌群
3MTM PetrifilmTM大肠杆菌/大肠菌群测试片
谢谢大家!
将涂片在火焰上固定，滴加结晶紫染液，染1min，水洗。
滴加革兰氏碘液，作用1min，水洗。
滴加95%乙醇脱色约15~30s，直至颜色液被洗掉。不要过分脱色，水洗。
滴加复染液，复染1min，水洗，待干，镜检。
结果： 革兰氏阳性菌呈紫色
革兰氏阴性菌呈红色
革兰氏染色法：
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IMVIC
色氨酸肉汤：在36±1℃培养24±2h后，-,上层出现红色为靛基质阳性反应。
MR-VP培养基：
在36±1℃培养48±2h。以无菌操作移取1ml至13×100mm试管中，加5%α-,40%，和少许肌酸结晶，振摇试管后静置2h，出现伊红色为VP试验阳性。
将MR-VP培养物的剩余部分再培养48h滴加5滴***红溶液。培养物变红则为***红试验阳性，变黄为阴性。
Kovacs氏枸橼酸盐肉汤：36±1℃培养96h后记录有无生长。
LST肉汤：于36±1℃培养48±2h，观察试管是否产气。
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谢谢！