文档介绍：第二次实验课
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内 容
（录象）
（讲解示教）
3. 细菌接种法（一份/组）讲解
、物品中细菌检查（一份/组）讲解
、空气中细菌检查（一份/桌）讲第二次实验课
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内 容
（录象）
（讲解示教）
3. 细菌接种法（一份/组）讲解
、物品中细菌检查（一份/组）讲解
、空气中细菌检查（一份/桌）讲解
（讲解）
7. 第一次实验报告评讲
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基础培养基的制备
去筋膜黄牛肉绞碎500g加入1000ml蒸馏水
直接煮沸2小时
调整酸碱度至pH
过滤，补足失水
重新校正pH一次
分装，高压灭菌，
15磅（℃）15～20分钟
检菌如无细菌生长
（液体透明）即可应用
脱脂纱布过滤，按比例加入1％蛋白胨、%
NaCl，%K2HPO4加热溶解补足水至1000ml
4℃浸泡过夜煮沸半小时
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人体、物品中细菌检查
手
衣
发
钱
材料：普通平板 （1份/组）
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
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飞沫、空气中细菌检查
材料：血平板 （1份/组）
距口15—20cm
用力咳嗽三次
置空气中
（避日光照射）
30分钟
飞 沫
空 气
盖上，标记 , 置 37℃，18-24h后观察。
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结果观察——血平板
表皮葡萄球菌在血琼脂平板培养基上形成不溶血的菌落。
甲型溶血性链球菌形成的α溶血现象也称为甲型溶血现象或草绿色溶血现象，属于不完全溶血。
金黄色葡萄球菌形成的β溶血现象也称为乙型溶血现象，属于完全溶血。
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细菌培养接种法——平板划线法
菌种：混合菌液
材料：普通平板
用具：接种环
方法：分区划线
1区
2区
3区
4区
原始区域
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半固体培养基
斜面培养基
细菌培养接种法--斜面接种、液体接种、半固体
菌种：大肠杆菌或葡萄球菌斜面
材料：斜面、液体、半固体培养基
用具：接种环、接种针
液体培养基
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结果观察——普通平板
普通琼脂平板培养基上，大肠埃希菌形成菌苔和菌落生长现象。
注意：大小、颜色、透明度、凸起度、表面干燥或湿润、光滑或粗糙、边缘是否整齐及血平板上的溶血情况。
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结果观察——液体培养基
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结果观察——斜面培养基
琼脂斜面培养基上大肠埃希菌形成的菌苔生长现象
菌苔（mossy）
指细菌生长繁殖后，在培养基 表面形成的一层培养物
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结果观察——半固体培养基
1、 扩散生长：具有动力的细菌,可见培养物扩散和培养基变混浊。
即有鞭毛的细菌：由穿刺线向外扩散生长（羽毛状或云雾状）
2、原位生长：没有动力的细菌，可见培养物没有扩散，培养基仍然澄清。
即无鞭毛的细菌： 沿穿刺线生长
2 1
1 2
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细菌代谢产物观察
细菌的酶不一样，对营养物质的分解能力不一样，
产生的代谢产物也不一样。
常见：
糖发酵试验
吲哚（indol）试验
***红（methyl red）实验
VP（Voges-Proskauer）试验
枸橼酸盐利用（citrate utilization）试验
尿素酶试验
硫化氢试验
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糖发酵试验
不同细菌分解糖类的能力和代谢产物不同。
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***红（methyl red）实验
M - ***红（methyl red）实验
葡萄糖→***酸→乙酰***甲醇 ***红 -
葡萄糖→***酸 ***红 +
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吲哚（indol）试验
I-吲哚（indol）试验
色氨酸→吲哚→玫瑰吲哚
↑
对二***氨基苯甲醛
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枸橼酸盐利用试验
C -枸橼酸盐利用（citrate utilizatio