文档介绍：阿莫西林在鸡蛋中的残留消除规律研究
桑卡娜 杨绒娟 李召斌 张文君 赵永峰 晏磊 周德刚 摘要 [目的]考察阿莫西林可溶性粉在雞蛋中的残留消除规律,确定其休药期,防止其在临床上的不合理使用。[方法]选取2组健康成年已开产蛋鸡分别残留超标的动物可食性组织,经胃肠道吸收容易造成过敏反应[2]和其他对身体的潜在危害。
阿莫西林残留量检测是当前中国、欧盟和北美等国家对动物性食品的必检项目之一[3]。大多数国家均对阿莫西林在动物食品中的最高残留限量(MRLs)作出了规定。2002年,原农业部第235号公告规定了动物性食品中兽药最高残留限量(maximumresidue limits,MRLs),其中阿莫西林在组织中的MRLs为50 μg/kg,在牛奶中的MRLs为10 μg/kg[4];日本厚生省颁布的《食品中农业化学品残留限量》则规定阿莫西林在鸡组织中MRLs为50 μg/kg,在鸡蛋中为10 μg/kg[5];欧盟规定阿莫西林和氨苄西林在所有动物性食品中的MRLs为50 μg/kg,在牛奶中为4 μg/kg[6]。
笔者研究了阿莫西林在鸡蛋中的残留消除规律,规范阿莫西林在养殖中的科学合理合规使用,分析其不合理使用及滥用后对人类健康的潜在危害,旨在为保障动物源性食品和人类生命健康提供理论依据。
1 材料与方法
试验材料
试验药物。
阿莫西林可溶性粉,有效成分30%,包装规格100 g/袋,生产厂家为河南某公司;
阿莫西林可溶性粉,有效成分30%,包装规格100 g/袋,生产厂家为山东某公司。
试验动物。
健康成年已开产蛋鸡90只,28周龄左右,体重为(±)kg。试验前预饲14 d,饲喂不含任何抗菌药物的全价饲料,自由饮水。
试验仪器与耗材。
电子天平,~1 g,为常熟市金羊砝码仪器有限公司产品;阿莫西林残留酶联免疫检测试剂盒,批号20190614,购自北京勤邦生物技术有限公司;其他耗材有脚标、5 mL注射器灌胃管等。
试验方法
试验分组。
成年健康已开产蛋鸡90只,利用EXCEL随机数字生成器分别对90只蛋鸡随机选择,分为3组,每组30只。其中Ⅰ组为试验组给予河南某公司的阿莫西林可溶性粉,Ⅱ组为对照组给予山东某公司的阿莫西林可溶性粉,Ⅲ组为空白对照组,不给药,正常饲喂不含任何抗菌药物的全价饲料。对所有鸡只进行给药前称重,依据称重结果进行给药。
给药方法。
阿莫西林按100 mg/kg体重剂量口服给药,每日2次,连用5 d。投药时将阿莫西林可溶性粉用水配成净含量为40 mg/mL的水溶液。药物现配现用,具体给药方法见表1所示。
样品收集与编号。
鸡蛋样品均在每天17:30—18:00收集,在收集后及时保存于4 ℃冰箱中。收集日期为给药期间(5 d)至停止给药14 d。所有鸡蛋编号原则为组别/日期。
样品检测。
采用阿莫西林残留酶联免疫检测试剂盒,对采集的鸡蛋样品进行药物含量检测。
标准曲线的绘制。
根据试剂盒说明,取试剂盒中阿莫西林各标准品溶液,测定不同浓度标准品吸光度值,以百分吸光率[(B/B0)×100%](B值为标准品或样本溶液的平均吸光度值,B0为0 μg/kg 标准溶液的平均吸光度值)为纵坐标,以不同标准品浓度的对数值为横坐标,绘制标准曲线,并推导出回归方程,进行相关回归分析。
试剂盒加标回收率试验。
取一定体积的阿莫西林标准品溶液添加至空白鸡蛋样品,使样品的药物含量分别为100、20、10 μg/kg,每个浓度的样品做2次平行。
阿莫西林鸡蛋样品前处理方法如下:称取(±)g均质后的鸡蛋样本至10 mL聚乙烯离心管中加入2 mL去离子水,用涡旋仪涡动1 min,3 000 r/min室温(20~25 ℃)下离心5 min移取200 mL聚乙烯离心管中,再加入200 μL复溶工作液,用涡旋仪涡动1 min,混匀,取50 μL用于分析。
试剂盒精确度试验。
取一定体积的阿莫西林标准品溶液添加至空白鸡蛋样品,使样品的药物含量分别为100、20、10 μg/kg,按试剂盒提供的方法样品预处理后进行检测。同一天内每个浓度重复5个样品,取平均值,计算日内变异系數。 阿莫西林在雞蛋中的含量检测。
检测前,首先将所有的试剂必须恢复到室温23~27 ℃,任何不用的试剂须立即