文档介绍：实验四 蛋白质的性质实验二
第1页，共12页，编辑于2022年，星期五
一 实验目的
1、了解蛋白质的***解离性质。
2、学****测定蛋白质等电点的一种方法。
3、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。
4、了解沉淀蛋白质的几种方法实验四 蛋白质的性质实验二
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一 实验目的
1、了解蛋白质的***解离性质。
2、学****测定蛋白质等电点的一种方法。
3、加深对蛋白质胶体溶液稳定因素的认识。
4、了解沉淀蛋白质的几种方法及其实用意义。
5、了解变性与沉淀的关系。
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二 实验原理---等电点测定
蛋白质是***电解质，即其分子中含有的
自由氨基和羧基均可解离，解离示意式如下：
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二 实验原理---等电点测定
蛋白质分子的解离状态和解离程度受溶液的酸碱
度影响。当溶液的PH达到一定数值时，蛋白质颗粒上
正负电荷的数目相等，在电场中，蛋白质既不向阴极
移动，也不向阳极移动，此时溶液的pH值称为此种蛋
白质的---等电点。
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二 实验原理---等电点测定
各种蛋白质分子由于所含的碱性氨基酸和酸性氨
基酸的数目不同，因而有各自的等电点。凡碱性氨基
酸含量较多的蛋白质，等电点就偏碱性，如组蛋白、
精蛋白等。反之，凡酸性氨基酸含量较多的蛋白质，
等电点就偏酸性，人体体液中许多蛋白质的等电点在
，所以在体液中以负离子形式存在。
所带电荷影响因素
内因：酸性、碱性氨基酸含量
外因：所在溶液环境的PH值
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二 实验原理---等电点测定
不同蛋白质各有特异的等电点。在等电点时，蛋
白质的理化性质都有变化，可利用此种性质的变化测
定各种蛋白质的等电点。最常用的方法是测其溶解度
最低时的溶液pH值。
本实验通过观察不同pH溶液中的溶解度以测定酪
蛋白的等电点。配制各种不同pH值的醋酸溶液，向各
个溶液中加入酪蛋白后，沉淀出现最多的缓冲液的pH
值即为酪蛋白的等电点。
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二 实验原理---沉淀反应
蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体溶液，
保持稳定的因素有两点：①蛋白质颗粒含有很多极性
基团，氨基，羧基，巯基等，亲水后形成水化层，使
蛋白颗粒互相隔开，不容易聚集；②非等电点状态
时，蛋白颗粒带有相同电荷，互相排斥。因此，蛋白
质在水溶液中，虽分子量很大，但仍能维持稳定的溶
解状态。在一定的理化因素影响下，蛋白质颗粒可因
脱水和失去电荷而沉淀。
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二 实验原理---沉淀反应
蛋白质变性后，有时由于维持溶液稳定的条件仍然存在（如电荷），并不析出。因此变性蛋白质并不一定都表现为沉淀，而沉淀的蛋白质也未必都已变性。所以，蛋白质的变性与沉淀之间没有必然联系。
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三 实验操作---等电点测定
（一）酪蛋白等电点的测定
（1）取同样规格的试管4支，按下表顺序分别精确地
加入各试剂，然后混匀。
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三 实验操作---等电点测定
（2）向以上试管中各加酪蛋白的醋酸钠溶液1mL，摇
匀。此时1、2、3、、、、
。静置10分钟后，观察其混浊度。最混浊的一管pH
即为酪蛋白的等电点。
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三 实验操作---沉淀反应
（二）蛋白质的沉淀及变性
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二 实验原理---沉淀反应
【各种沉淀法的比较表】
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