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高效液相色谱仪使用与操作规程学生用.ppt

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高效液相色谱仪使用与操作规程学生用.ppt

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高效液相色谱仪使用与操作规程学生用.ppt

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文档介绍

文档介绍:高效液相色谱仪使用与操作规程学生用
三)平衡系统
用检验方法规定的流动相冲洗系统,一般最少需6倍柱体积的流动相。
检查各管路连接处是否漏液,如漏液应予以排除。
观察泵控制屏幕上的压力值,压力波动应不超过1MPa。如超过则可初步判断为品液清洗进样针筒3遍以上,并排除针筒中的气泡;
5、溶剂瓶中的沙芯过滤头容易破碎,在更换流动相时注意保护,当发现过滤头变脏或长菌时,不可用超声洗涤,可用5%稀***溶液浸泡后再洗涤;
江西中医学院现代中药制剂教育部重点实验室
第四步、注意事项
6、 实验结束后,一般先用水或低浓度甲醇水溶液冲洗整个管路30分钟以上,再用甲醇冲洗。冲洗过程中关闭D灯、W灯;
7、 关机时,先关闭泵、检测器等,再关闭工作站,然后关机,最后自下而上关闭色谱仪各组件,关闭洗泵溶液的开关;
8、 使用者须认真履行仪器使用登记制度,出现问题及时向老师报告,不要擅自拆卸仪器。未经操作培训,不得擅自使用仪器。
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第四步、注意事项
四、使用经验交流(1)
1、流动相必须用HPLC级的试剂,使用前过滤除去其中的颗粒性杂质和其他物质()。
2、流动相过滤后要用超声波脱气,脱气后应该恢复到室温后使用。
3、不能用纯乙***作为流动相,这样会使单向阀粘住而导致泵不进液。
4、使用缓冲溶液时,做完样品后应立即用去离子水冲洗管路及柱子一小时,然 后用甲醇(或甲醇水溶液)冲洗40分钟以上,以充分洗去离子。对于柱塞杆 外部,做完样品后也必须用去离子水冲洗20ml以上。
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第四步、注意事项
四、使用经验交流(2)
,应该将柱子取下用堵头封好保存,注意不能用纯水保存柱子,而应该用有机相(如甲醇等),因为纯水易长霉。
(如甲醇)等清洗进样器。
,血样、生物样品。
,按预柱→混合器中的过滤器→管路过滤器→单向阀检查 并清洗。清洗方法:①以异丙醇作溶剂冲洗;
②放在异丙醇中间用超声波清洗;
③用10%稀***清洗。
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第四步、注意事项
四、使用经验交流(3)
,重现性差,所以在使用过程中要尽量避免产生气泡。
,要使用注射器吸液:通常在输液前要进行流动相 的清洗。
,不得注射强酸强碱的样品,特别是碱性样品。
,然后插入新的 流动相中。更换无互溶性的流动相时要用异丙醇过渡一下。
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高效液相色谱仪 中常遇见的问题及处理方法
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一、 保留时间变化








>25mmol/L的缓冲液

,调节流动相

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二、 保留时间缩短





,重新设定流速

~


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三、 保留时间延长





,更换泵密封圈,排除泵内气泡
,如加三乙***,或采用碱至钝化柱



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四、出现肩峰或分叉





,总的样品体积小于第一峰的15%

,采用较弱腐蚀性条件
,加在线过滤器,过滤样品

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五、鬼峰



***乙酸(TF