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无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中,置摇床震荡5分钟使土壤均匀分散成为土壤悬液。用1ml的无菌吸头从中吸取1ml土壤悬液,注入盛有99ml无菌水并带有玻璃珠的三角瓶中,吹吸三次,震荡均匀,制成稀释度为10-4的土壤溶液。逐次取1ml土壤溶液分装到灭菌后的Eppendorf管中,发给每个小组备用。
涂布
用一只新的无菌吸头,由稀释好的土壤稀释液中吸取100微升,较均匀地放入已写好稀释度的牛肉蛋白胨培养基平板上,用无菌玻璃涂棒涂布均匀,一定要多涂几遍,从概率角度来说,涂布时间越长越好(1~2分钟),使细菌均匀分布,此步是实验成功的关键。
培养
将牛肉蛋白胨培养基平板倒置于37度温箱中培养24小时,统计所长出的菌落数。
菌落计数
培养24小时后,取出培养平板,算出同一小组几个平板上的菌落的平均数,换算出土样中的菌数。
土壤中的细菌含量(个/g土壤)= 菌落平均数*10*稀释倍数
有较大片菌苔生长时,弃用,以无大片菌苔生长的培养皿计数;若成片菌苔大小不到培养皿的一半,其余一半分布均匀,将此一半计数*2
五、实验结果(试验品/菌落数)
1. 手套 27
书 4
餐卡 3
手表 22
未洗的手指 34
自来水洗过的手指 33
洗手液洗过的手指 1
肥皂洗过的手指 1024
土壤30,18,12(*10*稀释倍数=细菌含量)(三个样本)
六、实验讨论
1. 无菌操作要在酒精灯旁进行,同时不能离火焰太近;培养皿的盖要开小一点,以免空气中杂菌混入;操作要迅速。
2. 日常生活中吃剩的食物要尽量密封保存,如加保鲜膜,饭前要洗手
3. 在锅中盖着锅盖可以避免空气中杂菌的进入,且锅内环境不适宜细菌生长,因此不易坏,而在碗中食物没有与空气隔绝,且开放的环境与室温适宜细菌生长,因此易变质。
,且都远远小于用肥皂洗过的手上的菌落数,因此反复洗手对灭菌并无作用。
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对于实验结果:手指的检测结果数据相差较大,可能由于涂抹时用力不同导致接触面积不同从而使菌落数不同,今后实验时要注意尽量注意控制变量,在其他条件相同的情况下比较结果才更可靠。
II 固定化酵母细胞发酵啤酒实验与酸奶制作
实验目的
了解固定化细胞技术的方法和意义
了解酵母发酵产生啤酒的过程
学****酸奶制作方法
了解纯种发酵和传统发酵在无菌操作方面的差别
实验原理
固定化技术
固定化技术就是将生物酶或细胞固定在一定的基质上。由于在制定固定化细胞时,细胞和载体不起任何反应,细胞处于最佳生理状态;同时固定化细胞有载体作为屏障,可避免外界不利因素的影响,因此能迅速增值;增殖酵母凝集在凝胶表面形成浓厚的菌体层,因此酵母能迅速与基质接触,从而缩短周期,提高啤酒产量。
啤酒生产的过程