文档介绍：食品微生物课件
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本次课程内容
（略）
第2页，共38页，编辑于2022然后再用脱脂棉过滤。诱变后出现的不纯菌落，则可用适当的分离纯化方法加以纯化。
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诱变育种工作中应考虑的几个原则
选择简便有效的诱变剂：
物理诱变剂：紫外线、激光；X射线、γ射线和快中子等。
化学诱变剂：主要有烷化剂、碱基类似物和丫啶类化合物。
拟辐射物质：有些烷化剂例如氮芥、硫芥和环氧乙烷等除了能诱发各种点突变外，还能诱发一般只有辐射才能诱发的染色体畸变，所以它们也被称为拟辐射物质。
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选择诱变剂的种类：在选用理化因子作诱变剂时，在同样效果下，应选用最方便的因素；而在同样方便的情况下，则应选择最高效的因素。在物理诱变剂中，尤以紫外线为最方便，而在化学诱变剂中，一般可选用诱变效果最为显著的“超诱变剂”，如NTG(N-***-N’-硝基- N-亚硝基胍)。
采用简便有效的诱变方法：紫外线的照射最为方便。
化学诱变剂的种类、浓度和处理方法尤其是中止反应的方法很多，实际工作时可参看有关书籍。一种较有效的简易处理方法的大致操作步骤是：先在平板上涂上出发菌株细胞，然后在平板上均匀地放上几颗很小的诱变剂颗粒（也可放吸有诱变剂溶液的滤纸片），经培养后，在制菌圈的边缘挑取若干突变菌落，分别制成悬浮液，然后将其涂在一般平板表面使长出许多单菌落，最后可用影印培养法或逐个检出法选出突变种。
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充分利用复合处理的协同效应（synergism）
诱变剂的复合处理常常呈现一定的协同效应，这对育种工作是很有参考价值的。复合处理有几类：
①两种或多种诱变剂的先后使用；
②同一种诱变剂的重复使用；
③两种或多种诱变剂的同时使用。
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利用和创造形态、生理与产量间的相关指标
为了确切某一突变株产量性状的提高程度，必须进行大量的分析测定和统计工作，而一些形态变异虽能直接和迅速地加以观察，但又不一定与产量变异相关。如果能找到这两者间的相关性，则育种时初筛的效率就可大大提高。如在灰黄霉素产生菌荨麻青霉的育种中，发现菌落的棕红颜色变深者，产量往往有所提高
形态、生理与代谢产物产量间的相关性常常可通过人们的努力而加以创造。利用鉴别性培养基的原理或其它方法就可有效地把原来肉眼所观察不到的生理性状或产量性状转化为可见的“形态”性状。例如，在琼脂平板上，通过蛋白酶水解圈的大小、淀粉酶变色圈的大小，抗生素抑制圈的大小，生长因子周围某菌生长圈的大小，以及外***的沉淀反应圈的大小等，都可用于初筛工作中估计某菌产生相应代谢产物能力的“形态”指标。
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选用最适剂量
诱变剂剂量：一般指强度与作用时间的乘积。各种诱变剂有不同的剂量表示方式，如化学诱变剂以一定温度下诱变剂的浓度和处理时间来表示。在育种实践中，常以杀菌率来作诱变剂的相对剂量。
诱变剂的合适剂量：凡在提高诱变率的基础上，能扩大变异幅度，促使变异移向正变范围的剂量，就是合适的剂量。
要确定一个合适的剂量，常常要经过多次试验。就一般微生物而言，在一定的剂量范围内，突变率往往随剂量的增高而提高，但正变较多出现在偏低的剂量中，而负变则较多出现在偏高的剂量中；还发现经多次诱变而提高产量的菌株中，更容易出现负变。因此，在诱变育种工作中，目前大家比较倾向于采用较低的剂量。
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筛选方案
在实际工作中，一般认为应采用把筛选工程分为初筛与复筛两个阶段的筛选方案为好。前者以量（选留菌株的数量）为主，后者以质（测定数据的精确度）为主。例如，在工作量限度为200只摇瓶的具体条件下，为了取得更大的工效，有人提出了一些优选的筛选方案（可参考有关专著）
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筛选方法
一般通过初筛与复筛对突变株进行生产性能的测定。
初筛既可在培养皿平板上进行，也可在摇瓶中进行，两者各有利弊。
复筛是对突变株的生产性能作比较精确的定量测定。一般是将微生物摇瓶培养，然后再对培养液进行分析测定。
不仅需要设计效率更高的筛选方法，还应努力推广筛选操作的自动化。
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例：营养缺陷型突变株的筛选
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与筛选营养缺陷型突变株有关的三类培养基
基本培养基（MM，minimal medium）：仅能满足某微生物