文档介绍：课题 2 月季的花药培养一、被子植物花粉粒的形成花粉粒(N) 花粉壁细胞(2N) 花药花丝花粉橫切花粉囊小孢子母细胞 4个小孢子(小孢子四分体时期) 1个小孢子(单核居中期)1个小孢子(单核靠边期) 花粉管细胞核生殖细胞核花粉母细胞 2N (小孢子母细胞) 减数分裂 4个小孢子 N(四分体时期) 4个小孢子 N单核期居中期单核期靠边期有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核有丝分裂 8个精子双核期花粉壁细胞两个精子和一个营养核的基因型相同。花粉母细胞 2N (小孢子母细胞) 减数分裂 4个小孢子 N(四分体时期) 4个小孢子 N单核期居中期单核期靠边期有丝分裂 4个花粉管细胞核 4个生殖细胞核有丝分裂 8个精子双核期双核花粉粒: 成熟的花粉粒中,只含花粉管细胞核和生殖细胞核。 (精子在花粉管中形成) 花丝花药:囊状结构,内有很多花粉粒花粉是花粉母细胞(即小孢子母细胞) 经过减数分裂而形成的,因此,花粉是单倍体的生殖细胞。雄蕊: 花粉的发育要经历:四分体时期、单核期、双核期练****写出花粉的发育过程的发育过程(学生板书) ②假如一种生物体细胞有20条染色体那么它的小孢子母细胞、小孢子、花粉管细胞核、生殖细胞核各有多少条染色体?如果小孢子母细胞的基因型为 AaBb(两对基因位于两对同源染色体上)那么小孢子、花粉管细胞核和生殖细胞核的基因型是什么? 小孢子母细胞→4个小孢子→单核居中期→单核靠边期→花粉粒无论哪一种,来源于同一个小孢子的花粉管和生殖核的基因一定相同。 20、10、10、10, AB或Ab或a B或ab。形成原因:主要取决于培养基中的激素的种类及其浓度的比例二、产生花粉植株的两种途径合子胚: 由合子(受精卵)发育成的胚(含胚芽、胚轴、根根等) 花粉胚: 由单倍体性细胞产生的类似合子胚的结构。体细胞胚: 在组织培养过程中,某些体细胞在形态上转变为与合子发育成的胚非常相似的结构,发育过程亦与合子胚类似,被称为体细胞胚(胚状体)。三、影响花药培养的因素 1、材料的选择①不同植物的诱导成功率很不相同,就同一种植物来说亲本的生理状况对诱导成功率也有直接影响。②花期早期时的花药比后期的更容易产生花粉植物。选择合适的花粉发育时期是提高诱导成功率的重要因素。因为并不是任何时期的花粉都可以经过培养产生愈伤组织或胚状体。③花粉发育的过程中,只有某一个时期对离体刺激敏感。一般来说,在单核期,细胞核由中央移向细胞一侧的时期,花药培养的成功率最高。即: 最适合花药培养的小孢子发育时期为单核靠边期。④选择单核期以前的花药接种,质地幼嫩,极易破碎; 选择单核期之后的花药接种,花瓣已有些松动,又给材料的消毒带来困难,且难以挑选到单核期的花药。②某些植物的花粉细胞核不易着色,需采用焙花青-铬矾法, 这种方法能将花粉细胞核染成蓝黑色。①最常用的方法有醋酸洋红。 1、方法 2、培养基组成 P58 四、操作流程(一)材料的选取通过镜检确定其中的花粉是否处于适宜的发育期。 1000mL MS 培养基添加 2,4-D KT IAA 4mg 调 亲本植株的生长条件、材料的低温预处理以及接种的密度等对诱导成功都有一定的影响。 3、其他因素①醋酸洋红法染色机理 2、醋酸洋红法②染色操作醋酸洋红为碱性染色剂,而花粉细胞内的染色体易被碱性染料着色染成红色。将花药放在载玻片上,加一滴质量分数 1%的醋酸洋红,用镊柄将花药捣碎,盖上盖玻片在显微镜下检查。 3、焙花青-铬钒法花药应该在卡诺氏固定液中固定 20min ,然后取出放在载玻片上, 加焙花青--铬钒溶液染色, 盖上盖玻片后在显微镜下检查。