文档介绍：细心整理
红细胞凝集试验〔HA〕与红细胞凝集抑制试验〔HI〕
用疫苗按必需免疫程序进展免疫接种是限制鸡病流行的主要途径之一，这种观点已被广袤养殖户承受并引起足够重视。但鸡群免疫抗体的产生及维持时间受到鸡群免疫应答实力、所用疫苗种类、再在离心机中3000转/分别心5分钟，弃去上清液，再加生理盐水混匀，如此反复离心4～5次，最终一次离心后的红细胞，弃去上清液，即为红细胞泥。放入4℃冰箱中可保存2—3天。，然后
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，此即1%红细胞悬液。现用现配。
：-1ml,静置或离心，待血清析出后备用。
：运用1%的稀硫酸溶液。水10公斤，硫酸100毫升，将硫酸慢慢倒入水中，不断搅拌，操作时必需戴手套，口罩。
：重铬酸钾79克，水1000ml，硫酸100ml，将重铬酸钾磨碎，溶解于水中，然后慢慢参与硫酸100ml，不断搅拌，切不行将重铬酸钾水溶液倒入硫酸中，以防爆炸，操作时必需戴手套，口罩。
：为灭菌的生理盐水。
三、试验过程：
原理：某些病毒〔如新城疫、减蛋、流感〕能够与鸡红细胞发生凝集，此即为红细胞凝集现象。这种红细胞凝集现象可被特异性免疫血清所抑制，即红细胞凝集抑制试验〔HI〕。
应用：1、检测血清中的抗体水平，确定免疫时机。2、免疫后刚好监测，确认免疫效果。3、帮助诊断病毒性疾病。
包括血凝〔HA〕试验、抗原校正和血凝抑制〔HI〕试验三步：
〔一〕血凝〔HA〕试验：接受96孔V型反响板，测定抗原效价
1、首先用微量移液器向反响板的每孔加生理盐水25微升。
2、用微量移液器吸取待测抗原25微升于第一孔中并挤压6次混合，后吸出25微升至第2孔，依次倍比稀释到第11孔，弃去25微升。
3、微量移液器再吸取1%红细胞悬液依次参与各孔，每孔25微升。
4、置于微量振荡器上振荡1分钟。
5、室温静置30分钟后视察结果。
6、结果视察：将反响板倾斜成45度角，沉于孔底的红细胞沿着倾斜面对下呈线状流淌者为沉淀，说明红细胞未被或不完全被病毒凝集；假如孔底的红细胞铺平孔底，凝成匀整薄层，倾斜后红细胞不流淌，说明红细胞被病毒所凝集。能使鸡红细胞完全凝集的抗原的最高稀释倍数，称为该抗原滴度红细胞凝集效价。即沉淀的前一孔即为该抗原的效价。如彩图1所示第8孔红细胞为完全凝集，说明该抗原效价为1：256。
彩图1：
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图1 抗原效价为1：256
〔二〕4单位抗原校正：
1、依据抗原效价结果配制相应比例的抗原稀释液：即4单位抗原。
例：上图1：抗原效价为1：256，HI试验时，25微升抗原稀释液内须含4个凝集单位，那么应将抗原作256/4=64倍稀释。，。
2、首先用微量移液器向反响板的其次孔至第六孔加生理盐水25微升。第一孔不加。
3、用微量移液器吸取4单位抗原25微升分别参与第一孔、其次孔中，从其次孔起先挤压6次混合，后吸出25微升至第3孔，依次倍比稀释到第5孔，弃去25微升。
4、用微量移液器再吸取1%红细胞悬液依次参与1-6孔，每孔25微升。
5、于微量振荡器上振荡1分钟。
6、室