文档介绍：TORCH感染检测方法与结果分析
1971 年Nahmias 等首先描述了病原体感染对胎儿的致畸作用，他将数种能引起孕期宫内感染，甚至造成先天缺陷或发育异样的病原体英文名词的第一个字母组合而成“TORCH”，即弓形虫 ( T结合在固相表面，此抗原抗体复合物又能结合相应的酶标记物 ,
用洗涤方法除去未结合而游离的酶标记物，继而加入酶反应的底物后，底物被酶催化为有色产物，显色的程度与受检物中的抗原或抗体的量干脆相关，用合适的分光光度计或酶标仪进行比色，依据颜色反应的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，一般1分子酶在1min内可催化数十万乃至上千万分子底物变为产物，故可极大地放大反应结果，从而使测定方法具有很高的敏感度。
我们试验室检测抗体的具体步骤是:先将已知的可溶性抗原吸附于某一种固相载体表面，并保持其免疫活性。加入待检血清，患者血清与固相载体表面的抗原接触起反应，如血清中有相应特异性抗体存在，则抗体会与抗原结合在固相载体上，形成抗原—抗体复合物，洗涤去除过多的抗体。然后加入用辣根过氧化物酶标记的抗体复合物，后者将会与抗原—抗体复合物结合。
通过洗涤，洗去未反应的酶标记抗体，这样结合在固相载体上的酶量与标本中受检物质的量成确定的比例。加入酶反应的底物四***联苯***（TMB）后，底物经酶催化变为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量干脆相关，用酶标仪进行比色，依据颜色反应的深浅进行定性分析。
2、结果分析抗体中的IgM和IgG以高浓度遍布全身，是全身性体液免疫反应的主要效应分子。IgM是初次体液免疫应答早期阶段产生的主要免疫球蛋白，主要分布于血液中，抗全身感染的作用较强。IgG是再次体液免疫应答产生的主要免疫球蛋白，在血浆和组织液中各占50%左右，故几乎分布于全身各组织及体液中。IgG是唯一能通过胎盘的免疫球蛋白，故对新生儿抗感染起重要作用。
TORCH感染后，一般首先出现的是IgM，然后才产生IgG，感染后5～6天IgM＞IgG，20～30天IgM达到高峰。感染后4～8周IgG达到高峰，并维持多年至终生。
抗体试验结果说明参考表：
IgM IgG 结果解释
－－从未感染过。易感人群
＋－两周后复查，结果相同，
考虑为近期感染
－＋远期感染过，近期无感染
＋＋原发性感染或再感染
孕妇血清中IgM 阳性是诊断活动性感染重要而牢靠的指标，但由于它实际检测的是人体对TORCH感染的免疫反应状态，因此对那些处于潜藏状态不排毒的孕妇，或免疫系统发育不完善的孕妇，易出现漏检。
随着分子生物学技术的发展，依据检测病原体DNA 或RNA 的水平对感染进行诊断就更为干脆，并越来越受到围产医学界的关注。
TORCH抗体的检测一般用于孕前和孕早期病原体感染的筛查，IgM阳性妇女需进一步作病原体DNA或RNA检测以明确感染的存在。
二、TORCH病原体的检测方法与结果分析

1、检测方法检测TORCH病原体，临床常用方法是聚合酶链反应（PCR），又称体外酶促基因扩增法。
（1）标本采集 TOX采集EDTA防凝血2ml，利用低渗法提取白细胞；RV、CMV实行自凝血，离心提取血清；HSV、CT、UU、NG、HPV等实行宫颈分泌物。
（2）技术原理 PCR技术的基本原理类似于DNA的自然复制过程，是在模板DNA、引物和四种脱氧核糖核苷酸存在的条件下依靠于DNA聚合酶的酶促合成反应。PCR由高温变性—低温退火—中温延长三个基本反应步骤构成：① 模板DNA的变性：通过加热使模板DNA双螺旋的氢键断裂，双链解离成单链，以便它与引物结合；② 模板DNA与引物的退火（复性）：引物与模板DNA单链的互补序列配对结合。
当温度突然降低时由于模板DNA的分子结构较引物要困难的多，而且反应体系中引物DNA的量大大多于模板DNA，使引物和其互补的模板在局部形成杂交链，而模板DNA之间互补的机会较少。③ 引物的延长：在DNA聚合酶和四种脱氧核糖三磷酸底物及Mg2存在的条件下，模板-引物结合物，合成一条新的与模板DNA链互补的半保留复制链。以上三步为一循环，每一循环的产物可以作为下一个循环的模板。这样反复循环以上反应过程就能将待测目的基因数量呈指数倍数扩增放大几百万倍。
PCR产物可用凝胶电泳分析法分析结果。常用的是琼脂糖凝胶电泳，（EB），或在电