文档介绍：微生物实验报告
微生物实验报告
微生物实验报告
微生物实验报告答案
【篇一：微生物的革兰氏染色实验报告】
=txt>二、实验目的：
1、学****并初步掌握革兰氏染色法；
2、认识革兰氏染色的常有的蛋白酶产生菌。本实验将土壤样品（或其他样品）悬液加热办理，杀死非芽孢细菌及其他微生物后进行划线分别获得芽孢杆菌，将其接种到酪蛋白平板进行培养，根据酪蛋白平板的水解圈作初筛。也可直接将细菌或霉菌接种到酪蛋白平板进行培养，分别筛选其他蛋白酶产生菌。
土壤样品或其他富含蛋白质的样品、牛肉膏蛋白胨培养基平板、酪蛋白平板、无菌水（带玻璃珠）、芽孢染色液；显微镜、恒温水浴锅、酒精灯、接种针、游标卡尺、无菌移液管、无菌试管、量筒等。
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：、
，蒸馏水100ml左右，-。
：
，酪素
，琼脂
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1）采集土壤样品，用无菌水制备1：10土壤悬液。
2）取1：10土壤悬液5ml，然后将悬液按10、10、10、10
梯度稀
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释，注入试管中。
-1-2-3-4
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3）将这些试管放入
75-80
℃水浴中热办理
10min
，以杀死非芽孢
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细菌。
：
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1）将培养基灭菌办理。
：
1）根据酪蛋白平板的水解圈作初筛，精选出单菌落的蛋白酶产生菌。
2）将精选出的单菌落用平板划线法接种到牛肉膏蛋白胨培养基上，然后将平板倒置放于培养箱中24—48h。
1）挑去菌落涂片固定。
2）滴加1——2滴孔雀绿染液于已固定的涂片上。
3）用木夹夹住载玻片在火焰上加热，使染液冒蒸汽但勿沸腾，切忌使染液蒸干，必要时可增添少许染液
4）倾去染液，待玻片冷却后水洗至孔雀绿不再褪色为止。
5）用番红水溶液复染1分钟，水洗至水为无色。
6）待干燥后，置油镜察看，芽孢呈绿色，菌体呈红色。
：
1）用斜面划线法，取纯化判定后的菌种接种于斜面上，放于培养箱
中24—48h。
2）将培养后的菌种置于冰箱中保存。
：
在含酪蛋白的平板上，产蛋白酶的芽孢杆菌可形成蛋白质水解圈。自然界中分别的微生物各菌株间产蛋白酶活力有很大差别，有些芽孢杆菌酶活力超过4000u/ml。
1）描绘你所分别的蛋白酶产生菌的菌落特点和个体形态特点；
答：第一组：a:原液培养基表面出现大面积菌落，难以挑出所需单调菌落；
b:10
培养基表面菌落较多，但未发现与所需菌落有关特点；
c:10
培养基表面基本未出现菌落：
d:10、10均发现与所需菌落特点符合的菌落，持续培养待进一步纯
化。第二组：a：原液培养基表面出现大面积菌落，难以划分-2-3-
4-1
b:10培养基表面基本未出现菌落
c:10培养基表面基本未出现菌落：
d:10、10培养基表面均发现与所需菌落特点符合的菌落，持续培养待进一步纯化
2）报告你所分别的蛋白酶产生菌的初筛（水解圈与菌苔直径的比值）结果。
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答：求的平均hc值=-1-2-4-3
1）土壤悬液加热办理的温度和时间应正确控制；
2）点接含酪蛋白的平板时，接种量及接种面积要基真相同。
在酪蛋白平板上水解圈与菌落直径比值大的菌落，其蛋白酶活力不一定大，因此，对初筛选出的水解圈与菌落直径比值大的菌落要进行发酵培养，进一步对发酵液进行酶活力测定。
1）对所筛选的菌株怎样进一步提高酶活力？请写出设想和方案；答：采用蛋白酶产量较高的原始菌种，扩大培养后，采用低浓度的菌悬液，进行紫外线时间梯度照射，选用一个突变率较高，成活率也较高的时间，大批量的进行紫外照射诱变，然后在明