文档介绍：临床医学检验新技术
临床医学检验新技术
临床医学检验新技术
荧光定量PCR
所谓实时荧光定量PCR技术，是指在PCR反响体系中加入荧光基团，利用荧光信号积累实时监测整个PCR进度，最后经过标准曲线对未知模板进行定量剖析的方法。
技ting)是一种将高分辨率凝胶电泳和免疫化学剖析技术相联合的杂交技术
基来源理：免疫印迹与DNA的Southern印迹技术相对应，两种技术均把电泳分别的组分从凝胶转移至一种固相载体(往常为NC膜)，然后用探针检测特异性组分。不同的是，Westernblot所检测的是抗原类蛋白质成分，所用的探针是抗体，它与附着于固相载体的靶蛋白所体现的抗原表位发生特异性反响。该技术联合了凝胶电泳分辨力高和固相免疫测定特异敏感等诸多优点，拥有从复杂混淆物中对特定抗原进行鉴识和定量检测，以及从多克隆抗体中检测出单克隆抗体的优越性。
临床应用：免疫印迹法拥有剖析容量大、敏感度高、特异性强等优点，是检测蛋白质特性、表达与散布的一种最常用的方法，如组织抗原的定性定量检测、多肽分子的质量测定及病毒的抗体或抗原检测等。用免疫印迹技术可定性、定量地检测出待检样品中含量很低的特定病原体的抗原成分，关于一些能感染细胞而细胞病变不易察看的病原体的检测也很有用。用单克隆抗体做为第一抗体进行免疫印迹，还能够对毒株做分型研究。
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时间分辨荧光剖析法时间分辨荧光剖析法（Timeresolvedfluoroisnmunoassay,TRFIA）是近十年发展起来的非同位素免疫剖析技术，是当前最先进的免疫检测技术。技术原理：使用三价稀土离子（如Eu3+、Tb3+、Sm3+、Dy3+）作为示踪物，经过这些稀土离子与拥有双功能构造的螯合剂以及抗原形成稀土离子-螯合剂-抗原螯合物。当标记抗原、待测抗原共同竞争抗体，形成免疫复合物，由于免疫复合物中抗原抗体联合部分就含有稀土离子，当采取一些办法将联合部分与游离部分分开后，利用时间分辨荧光剖析仪，即可测定复合物中的稀土离子发射的荧光强度，进而确定待测抗原的量。正常情况下，免疫复合物中的稀土离子自己荧光信号很微弱，若加入一种酸性增强液，稀土离子从免疫复合物中解离出来，和增强液中的β-二***体、三正辛基氧化膦、TritonX-100等成分形成一种微囊。后者被激发光激发后，则稀土离子能够发出长寿命的极强的荧光信号，使原来微弱的荧光信号增强快要100万倍。采用时间分辨技术测量荧光，采用了门控技术，它是使背景荧光信号降低到零此后，再测定长寿命标记物的荧光。临床应用：时间分辨荧光免疫剖析可用来检测生物活性物质。在内分泌激素的检测，肿瘤标志物的检测，抗体检测，病毒抗原剖析，药物代谢剖析以及各样体内或外源性超微量物质的剖析中，应用TRFIA法越来越普遍。近年来，已将这项技术应用于核酸探针剖析和细胞活性剖析、生物大分子剖析，发展十分快速。一、TRFIA法在内分泌学中的应用内分泌激素是一些活性小分子，它们能与适合的抗体反响，拥有免疫反响性，但不能产生抗体，不拥有免疫原性，它们属于半抗原。对这些半抗原的测定，一般多用竞争性时间分辨荧光免疫法测定。这方面的测定主要有血清中孕***、雌二醇、睾***、甲状腺激素、前列腺素的测定等等。二、TRFIA在肿瘤学中的应用对一些完全抗原，它们大多是既有免疫反响性又有免疫原性的蛋白质类，主要包括促甲状腺激素、血清胰岛素、血清癌胚抗原、血清甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原等，主要采用非竞争性TRFIA法进行测定。三、TRFIA法在免疫学中的应用某些免疫细胞（如NK、LAK、T杀伤细胞等）的活性，能够用TRFIA法来检测。四、TRFIA法在微生物学中的应用当前TRFIA已宽泛应用于乙型肝炎病毒、脑炎病毒、流感病毒、呼吸道合胞体病毒（RSV）、副粘病毒、风疹病毒、马铃薯病毒、轮状病毒、人类免疫缺陷病毒（HIV）、出血热病毒和梅毒螺旋体的抗原抗体以及某些细菌和寄生虫抗体的检测。最近,潘利华等用TRFIA法进行了人血清中丙型肝炎病毒抗体(Anti-HCV)的检测，效果显然高于酶联免疫法。
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飞翔时间质谱技术飞翔时间质谱技术的发展，给临床肿瘤早期标志物的发现带来了划时代的革命，它将传统的往常一次只能测定一个蛋白标志物革命性地发展到一次可测定数十个，甚至数百个蛋白，同时极大的提高了诊疗的敏捷度和特异性。
技术原理：质谱仪需要在真空情况下运转，用以保护检测器，同时提高测量精度。在实际使用中，一个微孔需要被使用。仪器中气体样本首先经过微孔取样，然后抵达离子源，有脉冲电场送入飞翔时间模块。然后使用垂直于送入方向的脉冲电场对离子进行加快。这样做的主要目的是确定所有离子在水平方向没有初速度。在U型